足突蛋白阳性表达的肿瘤相关成纤维细胞促进口腔鳞状细胞癌侵袭转移的研究

Oral squamous cell carcinoma (OSCC) is the most common cancer in oral and maxillofacial region. The invasion and metastasis of OSCC are reasons for most death. It is reported that podoplanin is upregulated is OSCC and promotes the invasion of cancer cells. However, the role of podoplanin positive fibroblasts in the progression of OSCC is still illusive. Our previous study shows that podoplanin positve cancer-associated fibroblasts (CAFs) indicates poor survival of patients. Further study shows that the expression of miR-363 in CAFs is downregulated and fibroblasts uptake exosomes secreted by OSCC cells. We supposed that OSCC cells regulated the expression of podoplanin in fibroblasts through miR-363 in exosomes. Further study shows that podoplanin-transfected normal fibroblasts (NFs) undergo CAFs differenciation and higher proliferation. Our study, which will give insighful understanding of the role of podoplanin positive CAFs in the invasion and metastasis of OSCC, will provide new approch in therapeutics.

口腔鳞状细胞癌是发生在口腔颌面部鳞状上皮的恶性肿瘤，其主要致死原因是肿瘤细胞的侵袭转移。足突蛋白在鳞癌细胞中呈阳性表达，并可促进肿瘤细胞侵袭转移。然而，足突蛋白表达于肿瘤相关成纤维细胞的意义仍未得到清晰阐述。前期研究发现，足突蛋白在口腔鳞癌肿瘤相关成纤维细胞中呈阳性表达，并提示患者预后不良。进一步研究发现，足突蛋白阳性表达的肿瘤相关成纤维细胞中的miR-363的表达水平低于正常成纤维细胞；并且，口腔鳞癌细胞可通过分泌外泌体与成纤维细胞相互作用。据此推测，口腔鳞癌细胞可能通过外泌体中的miR-363影响成纤维细胞中足突蛋白的表达。深入研究发现，以足突蛋白基因转染正常成纤维细胞，可促使其向肿瘤相关成纤维细胞分化，并使其增值能力提高。因此，本课题的研究将有助于深入理解足突蛋白阳性表达的肿瘤相关成纤维细胞促进口腔鳞癌侵袭转移的机制，为口腔鳞癌的防治提供新的思路。

口腔鳞癌是发生在头颈部的恶性肿瘤。以肿瘤相关成纤维细胞为主的微环境为癌细胞提供侵袭土壤。前期研究发现，足突蛋白阳性肿瘤相关成纤维细胞存在活跃外泌体分泌，并且足突蛋白阳性肿瘤相关成纤维外泌体和正常成纤维细胞外泌体microRNA表达谱存在明显差异。因此，进一步筛选足突蛋白阳性肿瘤相关成纤维细胞外泌体microRNA及其下游靶基因，有利于探索口腔鳞癌侵袭转移机制。本课题第一部分研究发现，足突蛋白阳性肿瘤相关成纤维细胞可促进口腔鳞癌细胞侵袭转移；进一步研究发现，足突蛋白过表达的肿瘤相关成纤维细胞可分泌含有miR-374a的外泌体；口腔鳞癌细胞摄入含miR-374a的外泌体后通过WNT5A/β-catenin信号通路影响口腔鳞癌细胞形态并促进其侵袭转移。本课题的第二部分研究发现，肿瘤相关成纤维细胞外泌体miRNA-34a-5p表达水平低于正常成纤维细胞外泌体；口腔鳞癌细胞可以摄取肿瘤相关成纤维细胞分泌的外泌体miRNA-34a-5p；体内和体外miRNA-34a-5p过表达实验均发现，miRNA-34a-5p可抑制口腔鳞癌细胞的增殖和侵袭转移；进一步研究发现，AXL是miRNA-34a-5p下游靶基因；miRNA-34a-5p/AXL信号轴通过激活AKT/GSK-3β/β-catenin/Snail通路促进口腔鳞癌细胞发上皮间充质转化，进而促进口腔鳞癌细胞侵袭转移。该研究的价值在于发现了微环境中足突蛋白阳性肿瘤相关成纤维细胞促进口腔鳞癌细胞侵袭转移的外泌体miRNA途径；使得外泌体miRNAs成为口腔鳞癌治疗的潜在靶标。