中药益智仁燥性表征及盐炙润燥炮制原理研究

燥性是中药重要的性能之一，产生治疗作用或副作用，当为副作用时，多采用炮制手段降低或除去。目前有关中药燥性和炮制降燥研究均很少。本课题以益智仁为研究对象，古人认为"益智仁辛温而燥，长于温脾止泻摄唾；盐炙后缓和辛燥之性，长于暖肾固经缩尿"。课题组前期已对益智仁盐炙工艺、质量标准及"盐炙入肾o温肾缩尿"的机理进行研究。本课题提出"益智仁燥性与其温阳收涩功效有关，除脾喜燥外，对体内其他脏腑则存在一定的副作用；益智仁盐炙后燥性物质的改变和/或食盐直接拮抗作用即为盐炙润燥的本质"的科学假说。拟采用"燥性效用表征-燥性物质表征-盐炙润燥关键环节-盐炙润燥炮制原理"的研究模式，应用LC-MS、GC-MS、蛋白质印迹、实时荧光定量PCR检测等新技术，研究益智仁的燥性及盐炙润燥作用。通过本课题研究，有助于为研究中药燥性提供思路和方法；有助于全面深入理解中药盐炙理论，推动中药炮制学科的发展。

燥性是中药重要性能之一，产生治疗作用或副作用，当为副作用时，多用炮制降低或除去。古人认为“益智仁辛温而燥，长于温脾止泻摄唾；盐炙后缓和辛燥之性，长于暖肾固经缩尿”。益智仁是“盐炙润燥”经典炮制理论的代表药物之一，课题组采用了“燥性效用表征-燥性物质表征-盐炙润燥关键环节-盐炙润燥炮制原理”的研究模式。. 首先观察到益智仁燥性对番泻叶致腹泻小鼠的止泻作用；益智仁燥性对家兔离体肠肌收缩的抑制作用；通过连续给药28天，以小鼠症状、饮食量减少、饮水量增加、首次排便时间增加、干便粒数和重量减少、小肠和大肠肠腔水分减少、结肠肌电慢波频率增快而振幅减低等指标评价，以大鼠症状、饮食量减少、饮水量增加、首次排便时间增加、干便粒数减少、唾液流量减少、增大低切变率下的血液粘度、增强红细胞聚集指数等指标评价，分别成功复制益智仁“津伤内燥”小鼠和大鼠模型。以上从治疗作用和副作用两方面体现益智仁燥性效应表征。. 将益智仁水煎液通过系统溶剂法分为石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇、乙醇、水等不同部位，通过复制“津伤内燥”大鼠模型，筛选出益智仁燥性的物质基础在于石油醚和三氯甲烷部位。建立了石油醚部位的薄层色谱特征图谱、HPLC特征图谱，并建立了石油醚部位中圆柚酮的HPLC含量测定方法和含量限度。. 通过将盐炙过程分解为“炙加热”和“外加辅料食盐”两个步骤，增设清水炒益智仁（仅体现炙加热环节）和生益智仁外加食盐组，发现益智仁盐炙润燥的关键环节是在于“炙加热”和辅料食盐的综合作用。通过GC-MS分析，盐益智仁石油醚部位中香树烯、巴伦西亚橘烯、α-人参烯、β-瑟林烯、Khusilicacid、圆柚酮等相对百分含量较益智仁石油醚部位增加。在益智仁、清水炒益智仁、盐益智仁快速鉴别方面，建立傅里叶变换红外光谱（FTIR）和电子鼻气味指纹图谱分析方法，但FTIR不能有效区分，而电子鼻能将三者有效区分。. 通过免疫组化技术，发现益智仁盐炙后能显著增加因生益智仁带来的大鼠颌下腺AQP5表达降低的效应；能显著降低因生益智仁带来的大鼠结肠AQP4表达增强的效应；通过实时荧光定量技术，发现益智仁盐炙后能够显著增加因生益智仁带来的大鼠结肠c-kit mRNA表达降低的效应。以上即证明了益智仁盐炙后缓解生益智仁对唾液分泌、肠道的燥性效应，体现“盐炙润燥”的炮制原理。