Ku70基因启动子区多态性在肾癌发生发展及预后中的作用及其机制研究

Ku70做为DSBs修复通路中的一个重要基因，不光在维持基因结构的稳定方面起到重要作用，还可以独立参与调节细胞凋亡，调控肿瘤细胞对放、化疗的敏感性，与肿瘤的形成发展以及预后密切相关。本研究基于前期预实验，以及在线预测结合因子结果，拟采用病例-对照方法研究Ku70启动子区两SNPs-1310C>G和-745G>A与中国汉族人群肾癌发生危险性以及生存率之间的相关性，分析评价基因型-肿瘤临床特征间的关联性以及可能存在的环境-基因交互作用，并采用表面等离谐振分析、电泳迁移率变动实验、染色质免疫共沉淀以及细胞转染实验从离体水平验证两SNPs对结合因子结合力以及转录活性的协同影响，最后通过逆转录PCR、Western blot实验从在体水平去验证对转录活性以及蛋白表达的协同影响。揭示Ku70基因参与肾癌发生发展以及预后的可能生物学机制，寻找肾癌的易感性标志物，为今后肾癌的预防和治疗提供重要参考。

Ku70基因在DNA损伤修复、细胞凋亡、肿瘤细胞放化疗敏感性中起着重要的作用。目前已经发现，Ku70基因的表达异常会导致修复通路的调控异常。本研究科学假说为：Ku70基因启动子区遗传变异影响肾癌的发病风险和预后。通过生物信息学方法，我们筛选了2个位于Ku70基因启动子区域上的单核苷酸多态性位点（SNPs），在病例-对照研究（620例肾癌患者，623例健康对照）中发现，rs2267437多态性位点G等位基因能够显著增加罹患肾癌的风险（OR = 1.47，95%CI = 1.16-1.86）；而与肾癌患者预后的关系中未发现rs2267437与生存存在相关性。另外，rs132770多态性位点A等位基因人群的肾癌发病风险显著降低0.38倍（OR = 0.62，95% CI = 0.45-0.86）。功能学研究表明，Ku70基因rs2267437 C>G可影响Ku70转录活性；同时38例肾正常组织结果显示，携带rs2267437 G等位基因者肾组织中Ku70表达水平显著低于CC基因型者；另外，在rs132770位点中观察到，携带A等位基因者Ku70表达水平显著高于CC基因型者。该研究结果提示，Ku70基因启动子区遗传变异可作为潜在的重要的生物学标志物应用于将来肾癌的个体化预防、预后预测和治疗。