牛肌生成抑制素受体分子生物学特性研究

肌生成抑制素基因是1997年发现的一种骨骼肌的负调控因子，是肉质性状控制基因之一，降低或灭活牛肌生成抑制素基因将增加双肌牛的比例。本研究通过GST亲和层析法纯化牛肌生成抑制素C－端成熟肽。应用GST共沉技术和质谱技术对分布有牛肌生成抑制素细胞的细胞膜蛋白与牛肌生成抑制素相互作用，从而分析膜蛋白的结构。用放射性受体分析法对提取牛各组织的膜蛋白进行饱和结合实验及竞争结合实验，测定牛肌生成抑制素受体在各组织的分布情况。进而深入阐明牛肌生成抑制素作用的直接靶位点，揭示牛肌生成抑制素受体性质等相关问题，有助于人们从分子水平上探讨牛肌生成抑制素的作用机制，对其受体进行研究，寻找封闭该受体的手段，将为获得高瘦肉率动物打开新的思路开辟新途径，为进一步研究牛肉质性状基因作用机理和选育提供科学基础。

肌生成抑制素（MSTN）是1997年才发现的一种骨骼肌负调控因子，它的活性降低或失活将引起动物体骨骼肌的增加。干扰MSTN在体内的合成和释放、结合受体以及其信号传导等过程中的任何一个环节，均可有效抑制MSTN的功能，促进动物肌肉生长发育。研究体内MSTN的相互作用蛋白，对筛选MSTN抑制剂具有重要意义。本项目通过利用多项分子生物学技术筛选牛MSTN相互作用蛋白，经过GST Pull-down和免疫共沉淀试验鉴定，发现T-cap蛋白与牛MSTN存在相互作用，T-cap主要分布于骨骼肌和心肌，对肌原纤维节结构起重要作用。此外，课题组还研究了不同品种牛MSTN的多态性，研究发现在西门塔尔群体中等位基因C占优势，在夏洛莱群体中等位基因A优势，而在利木赞群体中未检测到这一突变。