IL-36β对JAK/STAT通路的调控在SLE的致病机制研究

SLE is a kind of autoimmune disease, cause serious damage to the reproductive health of women.We found that in patients with SLE,IL-36 beta and IL-36 R expression enhancement and associated with disease activity.However, IL-36 beta signal transmission mechanism by which lead to SLE has not been reported.We hypothesized that IL-36 beta may result in SLE pathogenesis regulation JAK/STAT pathway.This topic is proposed to separate patients with SLE blood lymphocytes, build the original T cell differentiation model, using IL-36 beta and JAK specific inhibitors; By using of flow cytometry, iTRAQ combined biological information analysis, immune coprecipitation, chromosome coprecipitation, SiRNA, cytokines chip, Realtime PCR and immunohistochemical techniques.From cells, animal and clinical comprehensive in-depth study on three layers induced IL-36 beta JAK/STAT activation mechanism and cause of SLE pathogenesis.The results not only can improve the immunological IL-36 beta to activate the molecular mechanism of JAK/STAT pathway; It will facilitate to comprehensively elucidate the pathogenic mechanism of SLE, lay theoretical foundation for the JAK inhibitors in the treatment of SLE.Moreover, it is expected to develop new targeted biological agents instead of corticosteroids in the treatment of autoimmune diseases.

SLE严重危害健康,我们研究已证实IL-36β作为促炎因子参与SLE发病。但IL-36β如何导致SLE发病及分子机制尚未明确。JAK/STAT通路与自身免疫病密切相关，且IL-1β可激活JAK/STAT途径；而IL-36β属IL-1家族，我们推测IL-36β调控JAK/STAT致SLE发病。本课题拟分离SLE患者血淋巴细胞，构建原始T细胞分化模型，采用流式细胞术、iTRAQ联合生物信息分析、免疫共沉淀、染色体共沉淀、SiRNA、细胞因子芯片、Realtime PCR、免疫组化等技术。从细胞、动物、临床三个层次上全面深入研究IL-36β对T细胞分化的影响、明确其激活JAK/STAT的分子机制、揭示其在SLE致病中的作用。旨在完善IL-36β激活JAK/STAT信号传导的理论，全面阐明SLE致病机制，为JAK抑制剂治疗SLE提供实验依据，并有望开发出新的高效靶向生物制剂替代激素治疗自身免疫病。

SLE严重危害健康,我们研究已证实IL-36β作为促炎因子参与SLE发病。但IL-36β如何导致 SLE发病及分子机制尚未明确。JAK/STAT通路与自身免疫病密切相关，且IL-1β可激活JAK/STAT途径；而IL-36β属IL-1家族，我们推测IL-36β调控JAK/STAT致SLE发病。本课题拟分离SLE患者血淋巴细胞，构建原始T细胞分化模型，采用流式细胞术、Western blots、Realtime PCR、免疫组化等技术。全面深入研究IL-36β对T细胞分化的影响、明确其激活JAK/STAT的分子机制、揭示其在SLE致病中的作用。旨在完善IL-36β激活 JAK/STAT信号传导的理论，全面阐明SLE致病机制，为JAK抑制剂治疗SLE提供实验依据。我们研究采发现IL-36β可以促进Th0细胞向Th1分化，并抑制Th0细胞向Treg细胞分化。IL-36β未能促进Th0细胞向Th2方向分化。JAK抑制剂能与IL-36β协同作用促进Th0细胞向Th1分化，并抑制Th0细胞向Treg细胞分化。我们还证实了IL-36β可激活小鼠脾单个核细胞JAK3/STAT2和PI3K/Akt通路，并且IL-36β可通过激活JAK3/STAT2和PI3K/Akt通路上调小鼠脾单个核细胞IL-17A表达，以及通过激活PI3K/Akt通路上调小鼠脾单个核细胞MCP-1表达。我们应用JAK3抑制剂和PI3K抑制剂，发现JAK3抑制剂明显减弱IL-36β激活PBMC中p-STAT2的作用，PI3K抑制剂明显减弱IL-36β激活PBMC中p-AKT的作用，从而证实了IL-36β可以激活JAK/STAT和PI3K/AKT信号通路。另一方面我们发现JAK3抑制剂明显减弱IL-36β上调PBMC中Il-17a mRNA的作用。我们还在SLE患者上分离单核细胞验证了IL-36β可激活JAK/STAT和PI3K/Akt信号通路与体外实验一致。总之，我们研究表明IL-36β通过JAK/STAT和PI3K/Akt参与SLE致病，提示JAK、PI3K抑制剂将有望成为有效治疗SLE的策略。