分化抑制因子1及其信号通路在胆脂瘤骨质破坏中的作用

本项目以临床胆脂瘤标本骨质破坏程度与破骨细胞数量不成比例这一问题为切入点，首次提出胆脂瘤上皮高表达的Id1，激活NF-κB 通路，上调细胞转录因子c-Fos 和 NFATc1, 促进破骨效应分子TRAP、CTSK、OSCAR等的基因表达，使高表达Id1并高度增殖的胆脂瘤上皮大量分泌TRAP、CTSK等破骨效应分子，参与中耳骨质吸收的合理假说。针对这一假说，从临床胆脂瘤标本、Id1基因转染的人角化细胞系以及以此细胞系注射裸鼠中耳，建立胆脂瘤动物模型三个层面设计实验，验证胆脂瘤上皮高表达的Id1，激活NF-κB 通路、上调具有破骨效应的细胞因子的表达与骨质吸收的关系。预期成果对深入了解胆脂瘤骨质破坏的关键信号通路与信号分子具有重要的理论意义，对于胆脂瘤骨质破坏的诊断与药物分子靶点的开发具有潜在的临床实用价值。

本课题以临床胆脂瘤标本骨质破坏程度与破骨细胞数量不成比例这一问题为切入点，首次提出胆脂瘤上皮高表达的分化抑制因子1（inhibitors of differentiation 1,Id1），可能通过激活核因子-κB ( nuclear factor kappa B, NF-κB)通路，促进破骨效应分子的基因表达，参与中耳骨质吸收的合理假说。针对这一假说，以Id1基因转染人角化细胞株Rhek-1A，建立体外模型；观察Id1基因转染Rhek-1A细胞后，增殖活性的变化，以及对NF-κB下游的破骨相关的信号分子或细胞因子表达的影响。结果表明，Rhek-1A细胞转染Id1后细胞增殖能力明显提高。实时定量PCR观察到CTSK在Rhek-Id1细胞的表达是Rhek-1A细胞的8.6倍；TRAP在Rhek-Id1细胞的表达是Rhek-1A细胞的3倍；NFATc1在Rhek-Id1细胞的表达是Rhek-1A细胞的1.3倍。发现Rhek-Id1细胞NFATc1的蛋白表达水平高于Rhek-1A细胞。以上结果提示，Id1可以引起Rhek-1A细胞过度增生，并上调CTSK 和TRAP等破骨效应分子的表达，这些可能与胆脂瘤上皮的增殖活性及骨质破坏有关。本课题还对胆脂瘤动物模型的建立进行了探讨。