hvps34/beclin-1自噬信号上调DNA-PK促进DNA DSB修复：多形性胶质母细胞瘤放射抵抗的新机制？

放射抵抗是多形性胶质母细胞瘤（GBM）放疗失败的主要原因。作为一种新近发现的辐射效应，自噬在放射生物学中的作用及机制研究渐成热点。我们前期研究发现：自噬在GBM中起适应性、保护性作用，是GBM放射抵抗的潜在机制；自噬抑制剂对GBM放射增敏的同时，延缓了DSB修复，提示自噬介导的放射抵抗可能是通过上调DSB修复来实现的。据此，本研究将深入研究离体和在体条件下，辐射诱导的hvps34/beclin-1自噬信号对DSB修复关键酶DNA-PK、DSB修复及GBM放射敏感性的影响，以期阐明自噬参与GBM放射抵抗的具体机制。我们拟应用透射电镜、MDC示踪、免疫组化及EMSA技术，系统和动态分析自噬对DNA-PK各亚单位表达水平、亚细胞定位、DNA锚定能力的影响；进而构建靶向可控RNAi下调自噬，探索其放射增敏作用和机制。开展本课题有助于进一步认识自噬在GBM放射抵抗中的作用，为肿瘤放射增敏提供新思路。

多形性胶质母细胞瘤(GBM)放射抵抗的分子机制及靶向干预是肿瘤工作者长期关注的课题。自噬作为一种新近被发现的辐射效应，其在肿瘤放射生物学中的作用和地位仍不清楚。最新的放射生物学研究结果提示自噬可能是肿瘤细胞逃避放射杀伤的适应性和保护性反应，靶向干预自噬信号传导能起到放射增敏作用。那么，自噬信号参与放射抵抗的分子基础又是什么呢？国内外尚未见该方向的报道。本项目小组通过为期3年的实验研究，以辐射诱导的自噬信号活化为切入点，深入探讨了离体和在体条件下，辐射诱导的hvps34/beclin-1自噬信号对DSB修复关键酶DNA-PK、DNA DSB修复及GBM放射敏感性的影响，创新性发现：1）自噬是联系乏氧、辐射等外源性胁迫因素致肿瘤细胞放射抵抗的枢纽；2）GBM细胞株诱导自噬的辐射阈剂量与放射敏感性呈正相关；3）辐射诱导的自噬在GBM细胞中起适应性、保护性作用，靶向阻断hvps34/beclin-1自噬信号能有效提高GBM放射敏感性；4）阻断自噬信号通过抑制NHEJ修复关键酶DNA-PK的表达、入核及其与DNA结合能力进而改善GBM细胞的放射敏感性。本项目证实了“靶向干预自噬信号提高GBM辐射敏感性”，为肿瘤放射增敏提供新视角和新靶点，同时也为临床上放疗增敏药物的开发、遴选提供新途径。