包虫感染犬免疫学和分子生物学鉴别诊断试剂盒的研究

囊型包虫病和泡型包虫病在我国西部地区广泛流行，对人体健康和畜牧业发展的危害性大。研究证明，犬是我国流行区两型包虫病的主要传染源。因此，准确诊断犬的感染情况对包虫病流行病学研究、控制措施的评估以及疾病的监测具有重要意义。本研究在我们前期研究成果的基础上拟建立以细粒棘球绦虫抗原B亚单位3(EgAgB8/3)的重组蛋白（rEgAgB8/3）为基础的，敏感、特异的，对细粒棘球绦虫和多房棘球绦虫感染犬的快速粪抗原诊断试剂盒及应用LAMP（Loop mediated isothermal amplification）技术，建立对犬感染两种棘球绦虫的快速鉴别试剂盒。

囊型包虫病和泡型包虫病在我国西部地区广泛流行，对人体健康和畜牧业发展的危害性大。研究证明，犬是我国流行区两型包虫病的主要传染源。因此，准确诊断犬的感染情况对包虫病流行病学研究、控制措施的评估以及疾病的监测具有重要意义。本研究用生物信息学软件对EgAgB1、EgAgB2、EgAgB3和EgAgB4抗原表位进行分析，发现了多个优势表位，为更进一步优化包虫的EgAgB抗原组分，制作高特异性的免疫学诊断技术奠定基础。制备的EgAgB8/3特异性多克隆抗体用于 ELISA-双抗夹心法检测犬粪 EgAgB8/3 天然抗原 获得了很高的敏感性和特异性，克服了EgAgB融合表达蛋白质带来的非特异性交叉反应， 肯定了选择 EgAgB8/3 为检测犬感染 E.g 粪抗原的意义，为rEgAgB8/3 蛋白 ELISA- 双抗夹心法粪抗原检测棘球绦虫感染犬快速诊断试剂盒的制备提供了科学依据。本研究成功设计E.g mtDNA CO1和 ND2基因的两套LAMP引物，E.g mtDNA CO1基因的LAMP引物的敏感性比普通 PCR 高出10倍。E.g mtDNA ND2基因的LAMP引物能够鉴别多房棘球绦虫，不与其他检测的寄生虫发生交叉反应，均显示出较好的灵敏度和特异度，故本研究初步建立了LAMP技术检测细粒棘球绦虫感染犬的新方法，在各项特异度、灵敏度和样本检测中展现出较好的效果。本研究的ELISA-双抗夹心法和LAMP技术检测对于准确诊断和评估新疆包虫病流行区犬科动物细粒棘球绦虫感染情况具有重要意义，但两种方法的稳定性和推广实用性还需用大量的流行病学调查资料进一步证实。