促红细胞生成素信号通路在缺氧诱导的LNCaP细胞神经内分泌样细胞转化机制中的研究

本研究旨在探讨促红细胞生成素（EPO）信号通路在缺氧诱导的LNCaP细胞神经内分泌样细胞转化中的作用机制。首先通过构建缺氧诱导下LNCaP细胞神经内分泌样细胞转化模型，验证缺氧参与这一转化过程；通过EPO信号通路在缺氧诱导的LNCaP细胞神经内分泌样细胞转化中的研究，验证缺氧相关的EPO信号通路在这一转化过程中的重要作用；进一步构建缺氧诱导的神经内分泌样细胞转化的LNCaP细胞亚系，研究其生物学特性；最后筛选与缺氧诱导的LNCaP细胞神经内分泌样细胞转化相关的分子标记物，预测前列腺癌神经内分泌样细胞转化及雄激素非依赖转化。我们推测长期缺氧激活EPO信号通路及下游的磷脂酰肌醇3-激酶或丝裂原活化蛋白激酶，从而促进前列腺癌细胞发生神经内分泌样细胞转化。课题是对前列腺癌雄激素非依赖转化缺氧机制研究的深入，为前列腺癌雄激素非依赖转化研究提供新思路和新方法。

本研究旨在探讨EPO信号通路在缺氧诱导的LNCaP细胞神经内分泌样细胞转化中的作用机制。首先通过构建缺氧诱导下LNCaP细胞神经内分泌样细胞转化模型，验证缺氧及缺氧诱导的EPO信号通路参与了LNCaP细胞神经内分泌样转化，其下游的STAT3信号通路起着重要的作用；而NSE是缺氧诱导的前列腺癌神经内分泌转化相关的重要分子生物学标记物。通过EPO信号通路在缺氧诱导的LNCaP细胞神经内分泌样细胞转化中的研究，验证EPO信号通路在这一转化过程中起着重要作用，抑制EPOR后LNCaP细胞在缺氧环境下出现生长抑制甚至凋亡，神经内分泌转化的标记物表达降低，进一步说明EPO-EPOR自主分泌环的形成是关键的分子生物学事件。我们还成功构建神经内分泌样细胞转化LNCaP细胞裸鼠皮下种植模型，证实缺氧诱导的神经内分泌样细胞转化恶性程度高。另外临床上我们用免疫组化检测方法比较了穿刺标本组织和CRPC（去势抵抗性前列腺癌）组织中EPO和EPOR表达，发现CRPC与内分泌治疗前的前列腺癌组织相比，EPO和EPOR表达明显增强，提示EPO－EPOR自分泌环可能参与前列腺癌激素非依赖进展。这些研究结果验证了我们的科学设想即缺氧通过激活EPO信号通路，促进前列腺癌细胞发生神经内分泌样细胞转化，为前列腺癌雄激素非依赖转化研究提供新思路和新方法。本课题的研究成果为前列腺癌诊疗体系的创新做出了重要贡献，课题负责人也因此荣获2012年国家科学技术进步一等奖（排名11）。此外获批专利1项，发表SCI论文1篇，中文核心期刊2篇。 . 目前还在进行中的工作包括神经内分泌样细胞转化LNCaP细胞系构建、神经内分泌样细胞转化LNCaP细胞去势雄性SCID鼠原位移植模型的构建以及NSE预测前列腺癌激素非依赖转化研究。细胞亚系和神经内分泌样细胞转化LNCaP细胞去势雄性SCID鼠原位移植模型的构建已经尝试改进实验方法。NSE预测前列腺癌激素非依赖转化的前瞻性研究因为等待缺氧诱导前列腺癌神经内分泌转化分子标记物而有所延迟。所幸的是我们已经迎头赶上，收集了激素依赖患者血标本25例以及激素非依赖患者血标本25例，进行上述标记物的检测，正在随访中。