一个免疫系统特异表达的小GTP酶septin1对人淋巴细胞活化的影响及分子机制研究

人septin1是我室1998年首次克隆并鉴定的一个新基因，它编码一个含有GTPase保守结构域的蛋白。我们的前期研究工作发现，septin1具有免疫系统特异表达的特征，利用RNAi技术降低它在T 淋巴瘤细胞中的表达能够引起细胞周期异常，死亡增加，增殖减慢。因此我们认为它对淋巴细胞的活化可能起着极其重要的作用。本项目拟研究septin1在人正常免疫细胞亚群中的表达分布特征，同时利用RNAi技术验证其对正常淋巴细胞活化的影响。同时，我们将以人Jurkat细胞株为模型，利用已有的酵母双杂交结果，深入研究septin1与人MAPK-ERK信号通路的关系，及其在Aik2作用下参与胞质分裂的过程，从而揭示其在淋巴细胞分裂增殖及应答胞外信号刺激时的功能机制，以及septin1用于新型免疫抑制剂筛选的药靶价值

Septin基因家族是一类除植物外几乎所有生物共同拥有的基因家族，但其功能的研究和认识，长期以来停留在酵母、果蝇等模式生物中，主要探讨该家族与细胞分裂与极化、囊泡运输等过程的关系。近5年人们开始关注哺乳动物中Septin基因家族成员的功能，尤其关注其与人类神经、生殖系统疾病发生的关系，及其在肿瘤发生过程中的作用。本项目选取了1998年由我室率先克隆得到的人septin1基因，鉴定其组织表达的特异性，并重点研究其对T细胞在特异信号活化过程中分裂增殖的影响。.本研究初次发现并鉴定了septin1是一个新的T/B细胞特异表达的基因，利用RNA干扰技术，我们发现T细胞内降低septin1表达将明显抑制其活化增殖过程，并延长其通过胞质分裂过程。进一步利用分子生物学技术，我们证实了septin1在AuroraB激酶的磷酸化修饰下参与细胞胞质分裂过程的调节，且septin1的Thr64及Ser248位被AuroraB激酶磷酸化；同时septin1在CK2激酶的磷酸化修饰下影响Erk的活化水平，从而影响MAPK信号通路调节的T细胞增殖过程，且septin1的Ser206位被CK2激酶磷酸化。为了进一步证实septin1对T细胞分裂增殖能力的调控是否可用于T淋巴细胞白血病的治疗，我们在5例人T淋巴细胞白血病病人的T细胞中利用RNA干扰技术降低了septin1表达，可明显观察到病人的T细胞在体外增殖能力降低，这说明通过调控septin1表达或功能活性，可有效降低人T淋巴细胞白血病病人T细胞的增殖能力，也初步说明septin1具有成为进一步开发新型抗人T淋巴细胞白血病药物的药靶潜力。