南方根结线虫类毒液过敏原蛋白基因的功能研究

南方根结线虫（Meloidogyne incognita）是一种致病性很强的植物寄生线虫，给世界农业生产尤其是大棚蔬菜的种植造成了巨大的经济损失。在当前国内外对根结线虫寄生机理尚不明确的背景条件下，本项目选择南方根结线虫寄生相关基因类毒液过敏原蛋白（venom allergen-like protein）基因作为研究对象，分别通过酵母双杂交系统钓取互作蛋白的编码基因，转基因植物过表达靶标基因后观察植物生长表型变化，RNA干涉（RNAi）诱导基因沉默后分析线虫致病力变化等研究，系统的分析南方根结线虫类毒液过敏原蛋白基因的功能，研究结果不仅对揭示植物寄生线虫与寄主互作的分子机理有重要的理论意义，同时对通过应用生物技术的手段设计新型的根结线虫防治策略也具有直接的应用价值。

南方根结线虫（Meloidogyne incognita）是一种非常重要的植物内寄生线虫，给世界农业生产造成了巨大的经济损失，分析其在寄生过程中所表达基因的功能是明确线虫与寄主互作分子机制的关键，同时也是提供有效防治该病害策略的基础。本研究以南方根结线虫类毒液过敏原蛋白（venom allergen-like protein）Mi-vap-2基因为研究对象，探索该基因在线虫寄生过程中的作用，目前已取得如下研究进展和结果：（1）培育了过表达Mi-vap-2基因的转基因烟草，表型观察显示Mi-vap-2在寄主植物中表达对植物器官的正常发育无明显影响；（2）构建了包含线虫侵染前与侵染后不同时间段烟草根系混合材料的cDNA文库，克服了以往线虫寄主互作研究只针对线虫侵染前材料的局限性，丰富了线虫互作基因研究的覆盖范围，同时通过酵母双杂实验证实Mi-vap-2与已报道的马铃薯金线虫同一家族基因Gr-vap1存在不同的作用靶标；（3）建立了烟草脆裂病毒（Tobacco rattle virus, TRV）介导的植物线虫基因沉默体系，以Mi-vap-2基因为靶标的研究证实抑制该基因的表达后线虫的繁殖数量及发育均无明显变化，本研究初步明确了南方根结线虫Mi-vap-2基因与线虫致病性的关系，同时建立的研究体系为下一步开展大规模线虫基因功能验证提供了保障。