新型载药微泡研制及其靶向治疗肿瘤实验研究

靶向药物治疗技术有望解决常规化疗药物缺乏靶向性、毒副作用大、疗效差的难题，成为肿瘤治疗研究的重点。目前，对靶向药物治疗的研究集中于药物载体的改进和靶向递送系统的探索。PLGA纳米微球以其载药量大、缓释、生物相容性好等独特优势成为一种较理想的化疗药物载体，但其靶向递送是有待解决的难点。超声靶向微泡爆破介导药物靶向传递技术（UTMD）是近年发展起来的极具潜力的靶向给药新方法，能有效提高靶组织局部药物浓度、提高疗效、降低毒副作用，但该技术以微泡作为药物载体存在载药量不足、稳定性差、药物在局部维持作用时间短等缺陷。.本项目拟结合微泡和PLGA纳米微球作为药物载体各自的优势及互补性，在前期研究成果基础上，创新性地将PLGA纳米药物微球以共价结合方式连接在微泡表面，研制一种高效、稳定的新型微泡药物载体，通过动物实验（肝癌模型）观察其靶向治疗肿瘤效果及作用机制。有望提供一种理想的药物载体和靶向给药系统。

用碳二亚胺法和生物素亲和素法两种方法制备表面连接PLGA纳米微球的新型微泡，并建立兔VX2肝癌模型，利用我们研制的低功率聚焦超声系统辐照爆破微泡进行肿瘤治疗，结果发现碳二亚胺法和生物素亲和素两种连接方法均有较多的PLGA纳米微球呈花环状聚集在脂质微泡表面，由于生物素-亲和素法存在免疫原性限制了其在体内的应用，因此我们应用碳二亚胺法连接的新型载药微泡进入体内实验。我们用制备的新型载药微泡进行体内外超声显影发现其与仍保持与普通脂质微泡相同的声学特性。我们对自制的超声药物定位控释系统体外爆破微泡焦域范围及其靶向优越性进行测定，发现，普通诊断超声可使声场内的全部微泡爆破，与普通诊断超声相比，低强度聚焦超声具有靶向爆破微泡的能力，其靶向性明显优于普通诊断超声。我们对低强度聚焦治疗超声的参数优化，发现声强度1.2 w/cm2，辐照60S释放的阿霉素量最高。我们进行了体内低功率聚焦超声靶向爆破微泡的优越性及参数优化，发现各组靶向辐照组织的阿霉素含量明显高于周围其它组织，并具有统计学意义。与其它组相比，声强为1.2 w/cm2，占空比为50%时，靶向辐照区域的组织阿霉素含量最高，这与体外测得的结果一致。因而，我们将最大释药量聚焦超声参数声强1.2w/cm2，占空比50%，辐照时间60s确定为最佳优化参数。我们用低强度聚焦超声联合新型载阿霉素微泡进行兔VX2肝癌治疗并评价治疗效果，发现，低强度聚焦超声联合新型载阿霉素微泡组肿瘤生长缓慢，中位生存期长达92天，抑瘤率为56.7%，PCNA的表达量最低、凋亡细胞最多，因此，低强度聚焦超声联合新型载阿霉素微泡能够有效控制肿瘤生长。