PD-1和Tim-3抑制性共刺激分子在CTL介导的CML免疫监视中的意义研究

Some patients with chronic myeloid leukemia (CML) treated by tyrosine kinase inhibitor (TKI) develop disease progression and relapse. Previous studies demonstrated that CML was very sensitive to the immunotherapy predominated by CML specified cytotoxic T cells (CTL). Increased expression and activation of inhibitory costimulatory molecules on CTL including PD-1 and Tim-3 are important causes of the cancer immune surveillance impairment,which facilitate immune evasion of cancer cells and lead to refractory and relapsed solid tumors and acute myeloid leukemia. The impacts of PD-1 and Tim-3 on function of CML specified CTLs and the outcome of the patients need to be clarified. The project is going to demonstrate that PD-1 and Tim-3 synergisticly inhibit CML specified CTLs by studing the expression of these two molecules and the association between the expression and the CTL function. Blocking studies in vivo and in vitro will be conducted to validate the recovery of CTL function by the supression of both negative costimulatory molecules. This project explores new ways to treat CML.

在酪氨酸激酶抑制剂(TKI)治疗后仍有部分慢性髓性白血病(CML)患者发生耐药或疾病进展。而以往的研究明确了CML对CML特异性杀伤性T细胞(CTL)为主体的免疫治疗十分敏感。作为负性共刺激分子PD-1和Tim-3在CTL上的表达增加与活化是CTL肿瘤免疫监视功能削弱的重要原因。已证实，在实体瘤和急性髓性白血病CTL上PD-1和/或Tim-3上调促进了肿瘤细胞发生免疫逃逸，导致疾病进展。而PD-1与Tim-3分子对CML特异性CTL的功能和疾病转归的影响尚不清楚。本项目将通过PD-1和Tim-3分子在CML特异性CTL上的表达规律，以及与CML特异性CTL功能的相关性研究，阐明两种负性共刺激分子协同性抑制CTL的CML免疫监视功能。并通过体内与体外的阻断性试验，明确两种负性共刺激分子受抑后CTL的功能重建情况，为CML的治疗寻找新的方法。

本研究旨在阐明PD-1和Tim-3分子协同性抑制CTL的CML免疫监视功能，并通过体内与体外的阻断性试验，明确两种负性共刺激分子受抑后CTL的功能重建情况，为慢性髓性白血病（CML）的治疗寻找新方法。共155例标本纳入分析，来自CML治疗不同时期、获得对酪氨酸激酶抑制（TKI）具有不同治疗反应的患者，结果证实：1. CD3+CD8+Tim-3+PD-1+/有核细胞比例，CCyR组显著高于MMR组，未获CCyR组有高于MMR组趋势；2.CD3+CD8+Tim-3+PD-1+/CD3+CD8+比例，CCyR组有高于MMR组趋势；3. CD3+CD8+Tim-3+PD-1-/CD3+CD8+比例，TKI耐药组显著高于MMR组，CCyR组有高于MMR组趋势。但是，组间数值差异较小（尽管p<0.05）。最重要的是，CD3+CD8+Tim-3-PD-1+/CD3+CD8+（%）比例，初发组38±13.83显著高于TKI耐药组，后者显著低于MR4.5组，而有低于CCyR组和MMR组的趋势。这与我们的预期结果恰恰相反，所以我们将研究转向了细胞遗传学与分子学的研究，比较两种检测方式在不同时间点的结合在CML患者治疗反应和预后中的预测意义。此外，针对TKI耐药患者的耐药机制进行探索，分析了TKI耐药状况与患者人口学特征、前期治疗和后续治疗结果之间的关系，并且发现，除了BCR-ABL激酶区突变外，还存在非BCR-ABL体细胞突变，后者很可能参与TKI耐药。我们还针对中国CML患者的生活质量、症状、治疗追求、治疗满意度等患者报告的结果进行研究。项目资助发表SCI 文章6篇，中文核心期刊论文10篇，国际会议壁报交流4次。培养硕士生2名，其中1名已经取得硕士学位，1名在读。项目投入经费70万元，支出62.2656万元，各项支出基本与预算相符。剩余经费7.7344万元，剩余经费计划用于本项目研究后续支出。