应用ELISPOT和四聚体技术研究结核与艾滋病相关结核诊断试剂

在现工作基础上，继续以ELISPOT筛选特异反应性Mtb多肽及扩增更多HLA DR等位基因、Alpha/Beta及Gamma/Delta TCR基因；构建重组昆虫表达质粒；筛选能表达上述复合物的S2恒定细胞株；表达纯化制备成四聚体。应用流式细胞、病理组织染色及ELISPOT，对结核病人标本多肽特异和四聚体阳性的各种免疫细胞分布、四聚体与阳性细胞间相互作用方式、细胞因子释放进行试验检测；期望能建立多肽特异性ELISPOT和3种四聚体检测方法并制备成临床实用的结核诊断试剂；在检测临床标本时,了解所选多肽抗原特点和HLA DR 等位基因抗原提呈能力及结核病人全身和局部组织免疫和免疫病理状况，尤其是Alpha/Beta CD4+ 和Gamma/Delta+ T细胞在结核免疫中的作用，在细胞和分子水平与免疫病理角度探讨疾病的致病机理；这对于深入了解结核的免疫控制及发展有效的新型疫苗同样具有重要意义。