Tiam1对胰腺癌细胞EMT的调控及其作用机制的研究

转移是导致90％以上肿瘤病人死亡的原因。由于对肿瘤转移的分子机制缺乏深入认识，故无法进行有效的干预。近年来, 上皮间质转换 (EMT) 过程被认为是肿瘤转移的重要机制，已成为当今肿瘤生物学研究的重点之一。我们在前期工作中发现Tiam1与胰腺癌的侵袭转移相关，且对胰腺癌细胞进行Tiam1沉默能显著抑制细胞增殖、转移及侵袭等EMT特性。本研究拟检测Tiam1及EMT相关蛋白在胰腺癌中的表达情况；通过基因转染和小分子RNA干扰技术，研究干预内源性Tiam1的表达后，对细胞EMT特性的影响；拟用染色体免疫共沉淀技术（ChIP）等技术，研究Tiam1影响胰腺癌EMT过程中，PI3K/Akt/GSK-3β信号通路的作用，以及PTEN的作用模式和效应。本研究将在分子相互作用、细胞功能、动物实验模型等层次上展开深入研究，以期揭示肿瘤转移的新的可能机制。

本项目基本上按照计划执行。通过对胰腺癌临床组织标本检测发现Tiam1在胰腺癌组织中较癌旁正常胰腺组织明显高表达，Tiam1在不同分化水平的胰腺癌组织中表达量没有差异，但是Tiam1在伴有淋巴转移或者远处转移的胰腺癌中，表达量较不伴有淋巴转移或者远处转移的胰腺癌要低。我们进一步研究发现Tiam1在胰腺癌细胞中起到促进增殖的作用。沉默Tiam1或者运用rac1特异性阻滞剂NSC23766都能在体外有效抑制胰腺癌细胞的增殖。我们进一步研究发现Tiam1-rac1通过wnt信号通路影响胰腺癌细胞的增殖。体内实验研究发现在沉默Tiam1或者运用rac1特异性阻滞剂NSC23766能有效降低胰腺癌细胞皮下种植瘤的生长能力，但并不能有效延长裸鼠的生存时间；而且在体外实验中除Tiam1或者运用rac1特异性阻滞剂NSC23766可以促进胰腺癌的侵袭迁移能力，这可能是因为抑制Tiam1-rac1激活RhoA。我们研究发现rac1和RhoA在胰腺癌细胞内的活性确实存在一个平衡，而且rac1和RhoA之间的平衡直接影响胰腺癌的增殖和侵袭能力，也就是在rac1活性高RhoA活性低的时候，胰腺癌的增值能力强；在rac1活性低RhoA活性高的时候，胰腺癌的侵袭能力强。最后我们通过建立胰腺癌脾内种植肝转移模型，发现只有联合抑制rac1和RhoA才能起到治疗胰腺癌的作用。通过本课题的研究，进一步阐释了Tiam1，rac1对胰腺癌生物学行为的影响，为开发新的胰腺癌治疗药物提供了新的方向。