氧化苦参碱对CP胰腺纤维化TGF-β1/STAT3信号通路的作用机制

慢性胰腺炎(CP)的发生与发展是以胰腺纤维化为主要病理特征，可引起不同程度的胰腺内外分泌功能障碍，严重影响患者的生活质量，而且目前尚无针对胰腺纤维化的治疗措施，主要因为胰腺纤维化的发病机制尚不完全清楚，所以探讨其机制和治疗都非常重要。中药成分氧化苦参碱(OM)对肝脏等器官的纤维化有明显的治疗作用并已用于临床，胰腺纤维化与肝脏纤维化的病理变化和发生机制类似，而且已证实转化生长因子β1（TGFβ1）是最强效的致纤维化细胞因子；我们的前期研究工作已证实OM对CP也有一定的治疗作用，但是其具体机制有待进一步深入研究。因此，本项目采用在体和离体动物实验，研究TGFβ1/STAT3信号通路在CP胰腺纤维化进展中的作用及在胰腺星状细胞（PSC）活化中的作用；同时研究OM能否减轻胰腺炎症、抑制PSC活化和对抗胰腺纤维化等，并探讨OM对TGFβ1/STAT3信号通路的影响，以阐明OM防治CP的作用及其机制。

慢性胰腺炎以胰腺纤维化为主要病理特征，可引起腺泡和胰岛细胞萎缩或消失，引起不同程度的胰腺内外分泌功能障碍。临床主要以腹痛、脂肪泻和糖尿病为主要表现，严重影响患者的生活质量。目前尚无针对胰腺纤维化的有效治疗措施，导致CP的治疗仍是一个世界级难题。已有大量研究证实中药成分氧化苦参碱对肝脏等器官的纤维化有明显的治疗作用，我们的前期研究工作证实OM对CP也有一定的治疗作用，但是具体作用机制有待进一步深入研究。.本课题采用在体和离体实验，研究TGFβ1/STAT3信号通路在CP胰腺纤维化进展中的作用及在PSC活化中的作用；同时研究OM能否减轻胰腺炎症、抑制PSC活化和对抗胰腺纤维化等，并探讨OM对TGFβ1/STAT3信号通路的影响，以阐明OM防治CP的作用及其机制。研究发现：在自激活方面，TGF-β1刺激胰腺星状细胞使Smad2、Smad3、Smad4上调，Smad7下调，从而激活Smad通路；另一方面，TGF-β1也可以使胰腺星状细胞中JAK2、STAT3、SOCS3表达升高，PSC活化的标志物α-SMA表达升高，炎症因子IL-1β、IL-6分泌增多；而OM干预可以抑制由TGF-β1引起的胰腺星状细胞的活化，抑制TGF-β1/Smad、TGF-β1/STAT3等信号通路的激活，减轻炎症反应。在细菌移位方面，LPS刺激PSC，可使TLR、MyD88等表达升高，NF-κB入核，TLR通路激活； OM干预可以抑制由LPS刺激引起胰腺星状细胞TLR通路的激活作用。在氧化应激方面，蛙皮素刺激胰腺腺泡细胞，p47phox和p67phox亚基转移到细胞膜，NADPH氧化酶被激活；而OM干预可以抑制由蛙皮素引起的胰腺腺泡细胞的氧化应激反应。在体实验方面，用DDC构建大鼠慢性胰腺炎模型，HE染色和Masson染色发现DDC使大鼠胰腺结构改变，发生胰腺炎和胰腺纤维化，用OM干预后，大鼠胰腺炎症和胰腺纤维化程度都减轻；在分子水平上，DDC可使大鼠胰腺组织中的JAK3/STAT3通路激活，而OM干预后可以抑制这一现象。以上结果表明，慢性胰腺炎的发生是多因素整合导致的，OM可以抑制这些因素从而减轻慢性胰腺炎和胰腺纤维化，为以后全面认识和治疗慢性胰腺炎提供新的思路，为OM的进一步研究、开发和利用提供理论依据。