新筛选的ERβ相互作用蛋白Id1在ERβ抑制乳腺癌细胞EMT中的机制研究

乳腺癌是雌激素依赖性肿瘤，其发生和进展和雌激素受体密切相关。课题组前期研究发现，ERβ1高表达抑制乳腺癌转移，且ERβ1和E-cadherin表达呈正相关，同时ERβ1过表达抑制TGF β诱导的乳腺癌细胞EMT。因此ERβ1可能通过抑制EMT过程进而抑制乳腺癌转移。且课题组新筛选的ERβ1相互作用蛋白Id1能诱导EMT且能抑制E-cadherin转录。当ERβ1和Id1结合后，抑制Id1功能，上调E-cadherin表达。结合文献报道和生物信息软件分析，我们推测ERβ1通过结合Id1促进E-cadherin启动子E-box顺式元件转录激活，抑制EMT发生，进而抑制乳腺癌转移。本项目拟采用基因干扰、荧光素酶报告基因、EMSA实验、动物模型等方法验证ERβ1通过Id1调控E-cadherin转录的分子机制并验证此过程参与抑制乳腺癌转移。以期揭示ERβ1抑制乳腺癌侵袭转移的可能机制。

乳腺癌是雌激素依赖性肿瘤，其发生和进展和雌激素受体密切相关，但其具体机制尚不十分清楚。课题组前期研究发现，ERβ1过表达抑制TGF β诱导的乳腺癌细胞EMT并抑制乳腺癌细胞转移，EMT过程中重要的标志分子E-cadherin与ERβ1的表达呈正相关，前期筛选的ERβ1相互作用蛋白Id1能抑制E-cadherin转录进而诱导EMT，那么ERβ1能否通过与Id1结合后，减少Id1对E-cadherin转录的抑制，从而促进E-cadherin的表达，抑制乳腺癌细胞EMT发生，进而抑制乳腺癌细胞转移呢。基于以上推测，本项目采用real time PCR，western blot，RNA干扰，荧光素酶报告基因分析，ChIP实验，以及动物转移模型等实验，从体内和体外研究ERβ1通过结合Id1促进E-cadherin表达，进而抑制乳腺癌细胞转移的具体分子机制。研究发现，在20例乳腺癌组织中ERβ1与E-cadherin的表达呈正相关；乳腺癌细胞中ERβ1上调E-cadherin的表达，且这种上调作用依赖于ERβ1的相互作用蛋白Id1；依赖于Id1的ERβ1上调E-cadherin的作用抑制了乳腺癌细胞的迁移和侵袭；动物乳腺癌转移模型实验显示，过表达ERβ1后，显著抑制小鼠乳腺癌的肺部转移。通过本项目研究，阐明了ERβ1通过依赖于Id1上调E-cadherin表达的重要调控通路，揭示了ERβ1抑制乳腺癌细胞转移的分子机制，为进一深入研究雌激素受体在乳腺癌发生发展中的重要作用以及寻找新的乳腺癌防治策略提供新的实验依据。