CIP2A在宫颈癌干细胞中作用机制的研究

CIP2A (Inhibiton of protein phosphatase 2A, CIP2A)是近年来被识别的能够与抑癌基因PP2A相互作用的癌蛋白，其在维持细胞恶性表型、促进肿瘤细胞生长、转化和体内成瘤中发挥着重要作用。本项目组研究发现CIP2A在宫颈癌组织中高表达且与组织分级正相关，并且，基于前期建立的宫颈癌干细胞研究平台还发现分选后的宫颈癌干细胞和分化细胞中CIP2A表达存在明显差异，提示其可能对宫颈癌干细胞的生长、分化具有调控作用。本课题旨通过对CIP2A在宫颈癌干细胞和分化细胞中表达差异的研究，建立CIP2A过表达/干扰系统，利用Pull down技术和免疫共沉淀技术发现在宫颈癌干细胞信号调控中的重要相关蛋白，阐明分子作用机制，加深对宫颈癌干细胞、CIP2A及其在宫颈癌干细胞中作用的认识，丰富干细胞理论，为临床诊断、预后评估及治疗提供科学依据。

肿瘤干细胞假说为肿瘤的深入研究提供了新的研究方向，基于SOX2核标记和ALDH1胞浆蛋白标记的肿瘤干细胞分选系统为CIP2A课题的顺利展开提供了良好平台。本课题旨在通过对CIP2A在宫颈癌干细胞和分化细胞中表达差异的研究，借助CIP2A过表达/干扰系统，发现其在宫颈癌、癌干细胞信号调控中的重要相关蛋白并揭示其分子作用机制，加深CIP2A在宫颈癌发生、发展中作用的认识，为基础研究及临床应用提供科学依据。实践中，通过对SOX2核标记和ALDH1胞浆蛋白标记分选出的富集宫颈癌干细胞群的研究，我们发现CIP2A在分选出的富含宫颈癌干细胞组中高表达，而在诱导分化细胞组中低表达。临床组织样本研究发现CIP2A的表达与肿瘤恶性程度（病理分级）、临床分期及淋巴结转移呈正相关。利用CIP2A过表达/干扰系统，研究发现CIP2A具有促进肿瘤细胞体外成球（宫颈癌干细胞培养体系）、肿瘤细胞侵袭/迁移及体内肿瘤形成（裸鼠移植瘤模型）的能力。借助Pull Down技术、质谱分析和体内/体外免疫共沉淀技术，我们证实CIP2A与H-Ras直接结合相互作用，通过调节Ras/MAPK信号通路促进上皮间质转化以利于肿瘤进展。综上所述，本课题成功利用SOX2核标记和ALDH1胞浆标记的宫颈癌干细胞分离系统证实CIP2A在宫颈癌干细胞富集组和非富集组中表达具有差异，CIP2A高表达有助于肿瘤形成及促进肿瘤迁移，CIP2A与H-Ras的直接蛋白-蛋白相互作用为宫颈癌进展的研究提供了分子作用依据，鉴于CIP2A的表达特点及分子特性，其有望成为宫颈癌临床诊断、预后评价及干预治疗的备选基因。