microRNA在骨桥蛋白促进胰腺癌转移中的作用及机制研究

胰腺癌具有强烈的向周围组织侵袭的倾向，易发生早期和广泛的转移，最新研究表明miRNA与胰腺癌等肿瘤的发生、转移密切相关。我们前期的实验结果表明，骨桥蛋白（OPN）与胰腺癌的发生、转移密切相关。本课题拟利用生物信息学方法预测靶基因为OPN的miRNA，从中筛选出在胰腺癌转移过程中表达显著改变的miRNA，进而阐述miRNA对OPN基因在胰腺癌转移过程中的调控作用，找到有效预防或控制胰腺癌转移的miRNA。同时和临床标本结合，分析所获得的差异表达miRNA和患者预后及肿瘤临床病理表型的关系，证实关键miRNA差异表达在OPN抑制胰腺癌转移中起重要作用，另一方面评估将胰腺癌相关miRNA的差异表达作为指导治疗、判断预后的生物学指标的临床应用价值，从而将生物信息学和临床有机结合起来。研究结果可为解释胰腺癌转移机制及防治在miRNA调节水平提供理论和实验依据并为胰腺癌的诊断、治疗和预后提供重要指导。

胰腺癌具有强烈的向周围组织侵袭的倾向，易发生早期和广泛的转移，最近的研究表明miRNA与胰腺癌等肿瘤的发生、转移密切相关。我们前期结果表明，骨桥蛋白(OPN)与胰腺癌的发生、转移密切相关。课题组在知情同意的前提下，收集胰腺癌组织标本和临床资料，建立了小样本组织标本库。首先利用RT-PCR、real-time PCR以及免疫组织化学等方法明确了OPN在胰腺癌组织中的表达，发现OPN在胰腺癌组织中明显高表达，在具有转移活性的胰腺癌细胞系中高表达，临床一般资料统计分析后发现OPN的表达水平与胰腺癌的淋巴结转移密切相关。进一步利用生物信息学方法预测发现miR-181a可能靶向OPN非翻译区并抑制其表达，荧光素酶报告基因系统和western blot确认miR-181a能靶向OPN抑制其表达。深入研究发现过表达miR-181a的胰腺癌细胞的侵袭能力明显降低，说明miR-181a是通过抑制OPN的表达调控胰腺癌的转移。