基于Wnt/β-catenin通路的解毒消癥饮对肝癌干细胞自我更新的干预研究

癌干细胞对化疗药物的不敏感性可能是恶性肿瘤复发转移的主要原因。清热解毒中药解毒消癥饮在临床上长期应用于消化道肿瘤围手术期的辅助治疗。前期研究发现其具有下调肝癌干细胞相关因子CD133和c-kit的表达水平，可能具有抑制肝癌干细胞生长的作用。本研究基于与肝癌干细胞自我更新和分化潜能休戚相关的Wnt/β-catenin通路，通过体外培养两种肝癌细胞株，流式细胞术分选具有癌干细胞特性的SP细胞，应用免疫化学染色、实时荧光定量RT-PCR、western blot等技术从体内和体外实验分别观察解毒消癥饮对SP细胞的数量、致瘤力和成克隆能力的干扰情况，以及对Wnt/β-catenin信号通路中相关基因和蛋白表达的调控情况，阐明解毒消癥饮干扰肝癌干细胞自我更新的机制，从癌干细胞的角度研究复方抗肿瘤的真正靶标，为其抗肿瘤转移和复发的理论找到有力的实验依据。

研究项目通过体内体外实验观察“解毒消癥饮”对肝癌SP细胞数量、致瘤力、成克隆能力的干预情况，以及对Wnt/β-catenin信号中几个关键基因蛋白的调控情况，明确“解毒消癥饮”是否具有抑制肝癌干细胞生长、干扰肝癌干细胞自我更新和分化特性的作用，从SP细胞的角度探讨“解毒消癥饮”抗肿瘤复发转移的机制。目前已完成项目所有研究内容，发现“解毒消癥饮“明显减少Huh7、PLC/PRF/5和Hep3B肝癌细胞株中SP细胞的百分含量，抑制其成克隆形成能力，使β-catenin由细胞浆和细胞核向细胞膜转位，下调下游基因和蛋白c-myc、cyclinD1的表达水平，并在动物实验中得到进一步证实，说明清热解毒中药“解毒消癥饮”可能通过Wnt/β-catenin信号通路调控肝癌SP细胞的自我更新能力。我们还发现”解毒消癥饮“通过抑制多梳家族成员BMI1的表达水平抑制肝癌细胞的增殖。此外，其还可通过调控SP细胞上的ABCG2和Oct4 mRNA水平逆转氟尿嘧啶耐药的作用，可能是”解毒消癥饮“抑制肝癌患者复发转移的机制之一。项目共发表论文15篇，其中sci收录7篇。