补肾调冲法促卵泡发育的TGF-β/smad信号通路调控机制研究

不孕症是全球生殖医学的热点，在中医肾主生殖的理论指导下，以补肾调冲为治法，治疗排卵障碍型不孕症效果显著，且副作用小，但其具体作用机制尚未完全阐明，因此，本课题在前期研究补肾中药对肾虚排卵障碍模型大鼠性腺轴以及卵巢功能影响的基础上，进一步深入探讨中医补肾调冲法治疗排卵障碍型不孕症的作用机理，观察补肾调冲中药- - 通脉大生片对大鼠卵巢颗粒细胞中由Smads介导的TGF-β/smads信号通路的影响，观察其对卵巢颗粒细胞增殖分化所起的作用。从现代医学角度揭示中医补肾调冲法治疗肾虚排卵障碍型不孕症的科学内涵，为提高临床不孕症患者妊娠率提供充分的实验依据，对中医妇科的学术和发展具有重要意义。

不孕症是全球生殖医学的热点，在中医肾主生殖的理论指导下，以补肾调冲为治法，治疗排卵障碍型不孕症效果显著，且副作用小，但其具体作用机制尚未完全阐明，因此，本课题在前期研究补肾中药对肾虚排卵障碍模型大鼠性腺轴以及卵巢功能影响的基础上，进一步深入探讨中医补肾调冲法治疗排卵障碍型不孕症的作用机理，观察补肾调冲中药——通脉大生片对大鼠卵巢颗粒细胞中由Smads介导的TGF-β/smads信号通路的影响，观察其对卵巢颗粒细胞增殖分化所起的作用。从现代医学角度揭示中医补肾调冲法治疗肾虚排卵障碍型不孕症的科学内涵，为提高临床不孕症患者妊娠率提供充分的实验依据，对中医妇科的学术和发展具有重要意义。研究结果发现，1. 肾虚排卵障碍模型大鼠存在生殖激素水平的失调。通脉大生片能提高FSH、LH、E2、P分泌，提高模型大鼠的生殖内分泌功能。2.通脉大生片可改善肾虚排卵障碍模型大鼠卵巢局部影响因子IGF-1、MMP-9、TGF-β1的异常水平，上调卵巢TGF-β1R的水平，通过调节卵巢自分泌-旁分泌系统，促进卵子发育和加速成熟卵泡的排出。3.肾虚排卵障碍模型大鼠存在TGF-β/smads信号通路的平衡失调。补肾调冲法可以有效上调卵巢信号传导因子TGF-β1及其受体表达量，还可上调卵巢细胞内的Smad3、 Smad4及P-Smad3的表达量，下调Smad7蛋白表达，通过调控smads蛋白的表达水平，进而改善卵巢局部的微环境。4.通脉大生片还可上调卵巢局部FSHR mRNA、LHR mRNA表达水平，提高卵巢对FSH、LH的反应性，以达促卵泡发育与排卵的功效；同时证实TGF-β1与FSHR mRNA、LHR mRNA呈正相关关系。5.模型大鼠下丘脑、垂体、卵巢、子宫形态结构及超微结构均受损。通脉大生片可以改善HPOA形态结构及细胞超微结构，还可作用于子宫内膜，恢复子宫内膜上皮细胞超微结构，促进子宫内膜增厚，向分泌期转变，从而增加子宫内膜容受性，有利于受精卵着床。基于以上结果，我们证实了通脉大生片能调控肾虚排卵障碍不孕大鼠的TGF-β/smads信号通路；中医补肾调冲法治疗肾虚排卵障碍型不孕其中部分治疗作用可通过对卵巢TGF-β/smads信号通路的调控来实现。