转渗透压耐性基因昆虫病原线虫的构建

昆虫病原线虫是新型的生物杀虫剂，其在环境压力下长期储存的稳定性影响了其应用的拓展。利用渗透压溶液诱导线虫进入脱水休眠状态从而提高其储存稳定性具有其他方法不可比拟的优点，具有很大的应用潜力。本研究将在鉴定和筛选渗透压耐性相关基因的基础上构建耐渗透压储存的转基因线虫。研究内容包括：（1）以qRT-PCR方法检测渗透压耐性相关基因在不同线虫中的转录情况，鉴定渗透压耐性相关基因；（2）分离、克隆并表达渗透压耐性相关基因和蛋白；（3）根据渗透压耐性基因序列设计引物合成dsRNA，应用RNA干扰技术研究基因功能；（4）构建对人畜及环境安全的转渗透压耐性基因的线虫，从基因水平改造线虫使其耐受环境压力，为组建渗透压诱导储存新方法以及促进昆虫病原线虫在害虫生物防治中的广泛应用提供基础。

昆虫病原线虫是新型的生物杀虫剂，其在环境压力下长期储存的稳定性影响了其应用的拓展。利用渗透压溶液诱导线虫进入脱水休眠状态从而提高其储存稳定性具有其他方法不可比拟的优点，具有很大的应用潜力。本研究测定了不同品种和品系昆虫病原线虫的渗透压耐性及渗透压诱导后的耐热能力差异，并在此基础上进行了一下研究（1）昆虫病原线虫S. carpocapsae A24渗透压诱导基因的差异表达（2）以qRT-PCR方法检测渗透压耐性相关基因在不同线虫中的转录情况；（3）分离、克隆并表达渗透压耐性相关基因和蛋白；（4）根据渗透压耐性基因序列设计引物合成dsRNA，应用RNA干扰技术研究基因功能；（5）对构建转基因昆虫病原线虫进行了初步尝试。.本项目共发表学术论文7篇，其中SCI论文5篇；参加学术会议2次，发表会议论文摘要1篇；申请国家发明专利1项；获得广东省科学技术奖励一等奖。项目培养了博士研究生1名，硕士研究生2名。项目研究为组建渗透压诱导储存新方法以及从基因水平改造线虫使其耐受环境压力从而促进昆虫病原线虫在害虫生物防治中的广泛应用提供基础。