P基因对Class I新城疫病毒生物学特性的影响

新城疫病毒(NDV)为单股负链RNA病毒，从遗传学上可分为Class I和Class II两类，两类病毒在基因组特性和抗原性上差异较大。我们从国内分离到多株Class I的NDV，通过对一株代表株NDV08-004进行全基因组分析，证实其基因组长度为15198个核苷酸，相对于Class II的经典毒株，在P蛋白基因编码区第579-590位插入12个核苷酸。Class I型的NDV毒力极易发生变异，至于其毒力发生变异的分子机制尚不明确，P蛋白基因插入的12个核苷酸对病毒毒力和致病机理国内外均没进行研究。本研究拟采用病毒拯救技术构建Class I型NDV的感染性克隆，通过基因缺失技术对其P蛋白基因进行突变修饰，构建重组病毒突变株，通过对研究P蛋白基因突变区域对病毒复制和生物学特性的影响，从而阐明Class I类NDV的致病机理。

项目完成情况：①通过持续监测表明，I类新城疫病毒分布广泛，在我国大部分地区活禽市场普遍存在；②研究表明，I类新城疫病毒宿主广泛，在鸡、鸭和鹅中均能分离到，在少数鸽群中也有检出；③分析表明I类新城疫病毒具有多样性，主要分为两个基因型，其中大多数属于基因3型，少数分离株为基因2型，而基因3型又可进一步分为3个不同的亚型；④建立的新城疫病毒复合RT-PCR技术能快速进行I类和II类新城疫病毒的快速检测和鉴别，可通过序列测序进行进一步的分子流行病学分析，能满足进行国内疫情监测、诊断和流行病学调查等工作的需要；⑤成功构建I类新城疫病毒的反向遗传操作系统，为开展I类新城疫病毒的致病机理奠定了基础；⑥采用定点突变技术构建了P基因缺失突变重组病毒，并首次证实P基因特点位点的12个核苷酸缺失对病毒的生物学特性没有显著影响。. 项目主要成果：取得鉴定的科技成果2项，获青岛市科技进步一等奖1项，编写论著1部，在国内外公开发表研究论文9篇，其中SCI论文3篇。