Btk/NF-κB协同作用致急性淋巴细胞白血病的机制研究

急性淋巴细胞白血病（急淋）的病理特点是淋巴细胞的幼稚化（分化障碍）和凋亡抑制，体内不成熟淋巴细胞堆积。Btk是影响淋巴细胞分化的重要激酶；NF-κB与细胞分化及凋亡亦密切相关。我们前期研究发现：1、 Btk/NF-κB联锁作用，形成Btk→NF-κB→Btk的正反馈调节机制，显著放大Btk及NF-κB的信号强度；2、活性增强的Btk具备细胞的恶性转化能力及抑制凋亡；3、急淋细胞中Btk的活性明显升高。在此前期研究基础上，本研究以淋巴细胞的分化障碍和凋亡抑制为切入点；以淋巴细胞、急淋患者以及急淋的模型鼠为研究对象；通过基因导入、基因沉默或特异性抑制剂等干预，观察Btk/NF-κB协同作用对细胞的分化、凋亡、模型鼠的疾病转归及信号分子的表达等的影响，以探索Btk/NF-κB协同致急淋白血病的机制。本研究具有源头性创新，对进一步阐明急淋的发病机制，为该病防治或药物的研发提供帮助。

急性淋巴细胞白血病（急淋）的特征表现为淋巴细胞的幼稚化和凋亡抑制，体内不成熟淋巴细胞堆积。Btk 是影响淋巴细胞分化与凋亡的重要激酶；急淋发病环节中的淋巴细胞分化受阻阶段正是Btk表达缺陷时B淋巴细胞分化异常的环节，提示急淋的发生可能与 Btk的表达之间存在某种联系。NF-κB 与细胞分化及凋亡亦密切相关。我们前期研究发现：1、Btk/NF-κB 联锁作用，形成 Btk→NF-κB→Btk 正反馈调节机制，显著放大Btk 及 NF-κB信号；2、活性增强的 Btk 具备细胞的恶性转化能力；3、急淋细胞中Btk 活性明显升高。在此基础上，本研究以淋巴细胞、急淋患者以及急淋模型鼠为研究对象，通过①Btk/NF-κB在不同病期急淋患者骨髓中表达；②Btk抑制剂（PCI-32765，Ibrutinib）/Dasatinib(Tyrosine Kinase Inhibitor, TKI)协同促进急淋细胞凋亡及其机制探讨；③Btk及NF-κB抑制剂对急淋小鼠疾病转归的影响及作用机制探讨；综合评价Btk/NF-κB 与急淋发生、发展及预后的关系。主要研究结果如下：一，Btk与急淋发生、发展有关。①Btk及NF-κB的表达、磷酸化水平与急淋发生、发展有关；②Btk与NF-κB的异常活化可能参与急淋的发生、发展。二，Btk抑制剂与其他TKI协同促进急淋细胞凋亡。①Dasatinib可抑制Ph+急淋细胞Sup-B15的增殖，与PCI-32765具有协同作用；②对于Ph-RS4;11细胞，单药Dasatinib无明显效果，但联用PCI-32765后，则可促进其凋亡，抑制增殖，机制可能是通过靶向抑制B细胞受体信号通路中的关键激酶Btk、Bcr-abl和Src家族激酶等，从而抑制恶性B细胞增殖，促进其凋亡。三，在动物模型水平，PCI-32765、Bortezomib可促进急淋细胞凋亡，有效延长模型鼠生存期。Ara-c与Bortezomib、PCI-32765联用具有协同作用，可进一步延长急淋小鼠的生存期。本研究通过临床及细胞系实验证实，Btk及NF-κB的表达与急淋发生、发展有关，并进一步在动物模型中获得验证，结果与本研究的原科研假设相符，为PCI-32765、Bortezomib应用于急淋病人的临床治疗，奠定了理论与动物实验基础。利用本研究的研究结果，成功申报并获得江苏省自然科学基金。