表达siRNA的缺陷HBV的构建及其抑制野生型HBV的研究

HBV cccDNA的持续存在是HBV慢性感染的根源，探索清除 cccDNA的方法是亟待解决的难题。松弛环状DNA（RC DNA）是cccDNA形成的前体，故阻断RC DNA的合成将致cccDNA减少。研究发现缺失某些序列的突变型rHBV的RC DNA合成效率更高，rHBV与HBV共存于细胞内时，由于①生长上的优势，rHBV将在数量上占优；②rHBV自身不能合成复制所必需的C、P蛋白，需利用野生HBV的C、P蛋白进行复制。从而竞争性抑制野生HBV的复制，但不能完全抑制。本项目利用上述原理，构建不表达任何病毒蛋白及删除特定序列后致RC DNA高效合成的rHBV，然后插入以被删除序列为靶标的siRNA转录单元，将rHBV-siRNA重组病毒构建入腺病毒载体，导入含野生HBV的HepG2.2.15细胞，研究该重组病毒对野生HBV的抑制作用，为HBV慢性感染的根治提供新思路。