PRDM1β基因表达调控机制的研究及其在淋巴瘤耐药逆转中的应用

淋巴瘤是原发于淋巴结或结外淋巴组织的恶性肿瘤，分为霍奇金淋巴瘤（HL）和非霍奇金淋巴瘤(NHL)。采用联合化疗、放疗、免疫靶向治疗及骨髓移植等综合方案治疗，虽然可使部分淋巴瘤患者长期无病生存，但大多数病人最终都会复发、对各种化疗药物耐药，预后极差。那些在淋巴细胞增殖、分化过程中起重要作用的分子，如PRDM1（PR domain containing 1, with ZNF domain）的表达异常与淋巴瘤发生和预后紧密相关。PRDM1β是PRDM1基因的一个转录本，研究发现它与弥漫大B细胞淋巴瘤及T细胞淋巴瘤对化疗反应差及预后差相关，由于它在部分淋巴瘤细胞中表达，因此，在淋巴瘤耐药中起非常关键作用。目前，对PRDM1β表达调控的确切机制还不十分清楚。本课题旨在阐明PRDM1β表达调控机制，寻找能够下调PRDM1β表达药物或分子，从而达到逆转淋巴瘤耐药，提高治疗效果，最终达到攻克淋巴瘤。

淋巴瘤是原发于淋巴结或结外淋巴组织的恶性肿瘤，分为霍奇金淋巴瘤（HL）和非霍奇金淋巴瘤(NHL)。采用联合化疗、放疗、免疫靶向治疗及骨髓移植等综合方案治疗，虽然可使部分淋巴瘤患者长期无病生存，但大多数病人最终都会复发、对各种化疗药物耐药，预后极差。淋巴瘤的耐药机制复杂，研究发现，PRDM1β是PRDM1基因的一个转录本，与弥漫大B细胞淋巴瘤及T细胞淋巴瘤耐药及预后差相关。本课题从转录水平、转录后水平及蛋白水平探讨了PRDM1β表达调控的确切机制。结果显示，在转录水平上，PRDM1β有着不同于PRDM1基因另一个转录本PRDM1α独立的启动子区，位于其转录起始位点上下游500bp区域。生物信息学分析和染色质免疫共沉淀结果表明NF-κB和MYC能够在转录水平上上调PRDM1β表达，参与淋巴瘤耐药。通过构建含5’UTR的过表达载体转染实验及5’UTR基因测序进行PRDM1β转录后水平机制研究，发现5’UTR序列不是PRDM1β转录后水平调控靶点，提示编码起始区序列可能参与了调控。通过microRNA芯片检测了PRDM1β高表达弥漫大B细胞淋巴瘤患者和PRDM1β低表达弥漫大B细胞淋巴瘤患者间microRNA的差异，结果显示40个microRNA在两组中有差异，其中有12个microRNA在PRDM1β高表达组中相对高表达，有28个microRNA相对低表达。然而进一步通过RT-PCR的方法验证4个microRNA与PRDM1β的相关性，尚未找到可以直接调控PRDM1β的microRNA。PRDM1β蛋白水平降解机制的研究，通过蛋白酶体抑制剂处理后免疫共沉淀实验，排除了PRDM1β主要经过泛素化途径降解的可能。综上所述，PRDM1β的表达主要通过转录水平调控，NF-κB和MYC基因可以从转录水平上调PRDM1β，可以选用NF-κB特异性抑制剂下调PRDM1β表达，逆转临床耐药，提高疗效，改善预后。