番石榴叶中作用于糖尿病相关靶标的活性成分及作用机制研究

多种转录因子和脂肪源性细胞因子与糖尿病的发生、发展密切相关，其中 PTP-1B 、PPARγ和PPARα是近年发现治疗糖尿病的具有突破性的重要新靶标。本项目从以糖尿病模型动物和体外PTP1B酶抑制实验确定番石榴叶有效部位入手，拟采用现代分离技术和光谱学技术对有效部位进行适当的成分分离、结构鉴定及PTP1B酶抑制活性靶向跟踪，并通过LC-NMR联用新技术对微量活性成分群进行组成和结构分析。继而借助HepG2、3T3-L1两种胰岛素抵抗细胞模型，利用Western blot技术研究化学成分（群）对PTP-1B，PPARγ/α靶点基因表达产物的变化，通过Caco-2单层细胞模型预测体外活性成分的吸收，最终采用2型糖尿病动物模型进行验证，确定活性成分，并通过DNA微阵列芯片技术探查目标药物分子对人类基因谱特别是糖尿病及其并发症多重基因表达谱的影响，揭示作用机制，从而确立候选药物或先导化合物。

具有生物活性的新结构类型化合物的发现为药物研发带来了前景和机遇。本课题在我们发现番石榴叶抗糖尿病有效部位PJ(2)，从中分离得到番石榴叶特有番石榴二醛类新奇结构的化合物（该类化合物在植物界属罕见），并发现化合物PG-7和Guajadial对治疗糖尿病的相关靶标PTP1B具有良好的抑制活性，但活性却弱于有效部位PJ(2),通过TLC和UV扫描证实PJ(2)中的流分尚含有未知的番石榴二醛类化合物的基础上，采用多层次（细胞、PTP1B酶、分子模拟）和多手段（色谱分离、NMR、UPLC-TOF-MS 分析、生物技术）相结合，继续研究番石榴二醛类新化合物，确定化合物的立体结构（CD、RCD、X-ray表征），形成番石榴二醛类系列化合物体系，以期发现和寻找抗糖尿病活性更强的物质，深入探索其作用机制。