含rAFP的蜂毒素基因重组腺病毒肝癌细胞内转染后的攻击模式

我们以往的研究证实，含甲胎蛋白启动子(rAFP)的携蜂毒素基因重组腺病毒在肝癌细胞转染后，对肝癌细胞有非常显著的抑制或杀伤作用，但其作用途径与方式尚不清楚。本实验拟应用光镜、电镜、Hoechst33342-PI染色荧光显微镜观察细胞凋亡与死亡及细胞器变化、AnnoxinV-PI染色法检测细胞凋亡与死亡;FCM测定线粒体膜电位、细胞内Ca2+，细胞内外K+检测研究细胞膜的通透性;免疫组化、原位杂交检测Caspase-12、9、3 mRNA及蛋白质表达等，研究含rAFP的携蜂毒素基因重组腺病毒对人肝癌AFP阳性表达细胞系BEL-7402与HepG2在细胞细胞内转染后的攻击模式以及产生杀伤作用的信号途径,以了解其作用的分子机制，为今后应用于临床提供重要实验依据，为有毒中药有效成份以基因重组载体转染的方式进入病灶的用药途径提供重要参考。