致肾盂肾炎大肠杆菌新致病基因的研究

肾盂肾炎是尿路感染中最重要的形式,属于多发病,细菌耐药和高复发率给治疗带来极大困难。本项目在已有工作的基础上，寻求国内优势流行型代表株UPEC132新的致病基因。采用SSH方法，以UPEC132为tester，以E.coli K-12 MG1655为driver,构建UPEC的差减文库，分析两者之间的差异，经过筛选明确文库中同源性序列和132特异性SSH片段，并确定SSH片段作为UPEC菌株的共有性和特异性特征。根据新发现UPEC132特异性SSH片段序列设计引物，采用Genome-walker方法鉴定出完整的ORF，并进行克隆和真核系统表达；将所获得的含有特异性SSH片段克隆株进一步用细胞培养和动物实验方法相结合，确定新发现基因（ORF）的致病作用。该研究对了解国内外菌株的特点和差异及阐明细菌多样性和规律性本质方面具有重要意义，为UPEC致病机理的深入研究奠定基础。