足细胞在免疫应答中的作用及免疫损伤研究

足细胞损伤可导致大量蛋白尿的产生，足细胞在肾脏局部免疫调控中的作用目前知之甚少。研究发现，足细胞可以表达抗原提呈的共刺激分子B7家族成员以及天然免疫中发挥重要作用的Toll样受体家族成员，提示足细胞可能在免疫监视中发挥重要作用。我们前期工作发现外源性蛋白刺激下足细胞可高表达CD2AP分子，后者亦称为"免疫突触"，可在T细胞和抗原提呈细胞之间发挥衔接作用。我们还发现，足细胞有吞噬蛋白质的功能，即可能存在处理抗原的能力。这些研究提示，足细胞极可能是肾脏局部的专职抗原提呈细胞。本研究中，我们在前期工作的基础上，通过TLR4的配体LPS刺激实验，观察足细胞在天然免疫中的作用；通过细胞和整体的抗原提呈实验，观察足细胞在获得性免疫中作为抗原提呈细胞的特征性；最后探讨免疫应答对足细胞自身的损伤及潜在的治疗靶点。本课题将揭示足细胞在免疫监视中的作用，为进一步针对足细胞的靶向治疗提供理论和实验依据。

足细胞的损伤可导致大量蛋白尿的产生，足细胞在肾脏局部免疫调控中的作用目前知之甚少。研究发现，足细胞可以表达抗原提呈的共刺激分子B7家族成员以及天然免疫中发挥重要作用的Toll样受体家族成员，提示足细胞可能在免疫监视中发挥重要作用。我们前期工作发现外源性蛋白刺激下足细胞可高表达CD2AP分子，后者亦称为“免疫突触”，可在T细胞和抗原提呈细胞之间发挥衔接作用。此外，我们还发现足细胞有吞噬蛋白质的功能，这些蛋白质分子分子量大小不一，显示足细胞可能存在处理抗原的能力。因此我们提出这样的假设：足细胞极可能是肾脏局部的兼职抗原提呈细胞。为此，本课题的研究从以下三方面的探讨：1、首先探讨足细胞的在天然免疫监视中的作用，即以细菌内毒素脂多糖诱导先天性免疫（模拟感染）。我们观察到足细胞在LPS刺激下TLR4在细胞内的分布发生了转位，共刺激分子（CD80）、细胞表面粘附分子（ICAM）及相关炎性因子（IL-6）和趋化因子（MCP-1）等均发生明显的变化，其最终可产生的生物学效应是足细胞的损伤或凋亡。2.我们通过细胞和整体的抗原提呈实验，观察足细胞在获得性免疫中作为抗原提呈细胞的特征性。在细胞水平上，我们用已荧光标记的卵白蛋白孵育足细胞，观察到了足细胞对其的吞噬效应，在这一现象中伴随着MHC-Ⅱ类分子表达的变化。在体外，我们从小鼠原代培养提取了小鼠肾脏的足细胞脾脏淋巴细胞以及骨髓巨噬细胞。通过与抗原蛋白的共孵育，我们观察到了足细胞在抗原提成后对CD4T淋巴细胞的增值效应，虽然其效应远不及专职的抗原提成细胞即巨噬细胞。结果证实了我们的设想。3.最后我们通过特异抑制的TLR4和MHC-Ⅱ类分子，观察到在LPS和卵白蛋白刺激下，抑制足细胞的免疫对足细胞自身的保护作用。以上结果显示，足细胞不仅仅是肾小球滤过屏障的一部分，其在肾脏局部亦发挥着免疫监视和抗原提成作用，抑制其免疫功能对足细胞本身有保护作用，这为下一步针对足细胞的靶向治疗提供理论和实验依据。