红景天苷对动脉粥样硬化模型内皮祖细胞功能的影响及机制

The number and function of EPCs were reduced in the patients with cardiovascular risk factors such as hyperlipidemia, hypertension and diabetes, which could accelarate the pathological progression of atherosclerosis. We have found that salidroside could inhibit EPCs apoptosis induced by oxidized low-density lipoprotein, and up-regulate the activation of AMP-activated protein kinase in EPCs. The effects and possible mechanisms of salidroside on EPCs with impaired activity are still elusive. The aim of this study is to explore the protective effects and mechanisms of salidroside on impaired functional EPCs. The proliferation, migration, angiogenesis and apoptosis of EPCs from atherosclerotic model will be tested, and the activation of related mediating pathway PI3K/Akt will be investigeted. Furthermore, the role of AMPK in the protective effects of salidroside and its regulation on PI3K/Akt pathway will be illustrated by regulating AMPK activation. The results will provide a theoretical and practical basis for the clinical use of salidroside in the prevention and therapy of atherosclerotic diseases.

高脂、高血压、糖尿病等动脉粥样硬化危险因素损害了内皮祖细胞(EPCs)的功能，加速了动脉粥样硬化的进展。我们在前期研究中发现，红景天苷能抑制氧化低密度脂蛋白诱导的骨髓来源EPCs的凋亡，上调EPCs中腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)的活化，但红景天苷对EPCs生物活性的影响及调控通路尚需进一步阐明。本研究拟利用已建立的动脉粥样硬化小鼠模型中功能受损的骨髓来源EPCs，观察红景天苷体内外干预后，EPCs增殖、迁移、体内外血管生成和凋亡率的改变，以及功能调控相关通路磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B (PI3K/Akt)的活化，初步探讨红景天苷对EPCs的保护效应和机制，并通过对AMPK磷酸化活化的调控探索AMPK在红景天苷上调PI3K/Akt 通路及调节EPCs生物活性中的作用，为红景天苷在动脉粥样硬化性疾病治疗中的临床应用提供理论基础和实验依据。

高脂、高血压、糖尿病等动脉粥样硬化危险因素损害了内皮祖细胞(EPCs)的功能，加速了动脉粥样硬化的进展。上调EPCs的数量以及增殖、迁移、促血管生成的能力可使EPCs更好地发挥治疗作用。PI3K/Akt信号传导通路的活化已被证实对EPCs增殖、迁移和促血管生成能力有重要调节作用。以PI3K/Akt信号通路为作用靶点的药物，可能拮抗动脉粥样硬化（As）危险因素诱导的EPCs的功能损伤。红景天苷是从红景天中提取的活性单体，是红景天的有效成分，红景天苷对EPCs功能的调节仍有待更多的基础实验来阐明。本课题通过高脂饮食建立As小鼠模型，观察红景天苷灌胃对As模型小鼠主动脉内皮功能及斑块稳定性的影响，并通过灌胃以及体外孵育两种方式检测红景天苷对As模型骨髓来源EPCs增殖、迁移、血管生成能力及细胞凋亡的影响，以及红景天苷孵育对上游信号通路PI3K/Akt的活化，构建腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）基因siRNA载体转染EPCs，验证AMPK调节PI3K/Akt通路活化在红景天苷EPCs功能调节中发挥的作用。课题研究通过体内外实验证实红景天苷干预能增加As模型小鼠主动脉动脉粥样硬化斑块的稳定性，上调PI3K/Akt信号通路，增加EPCs的增殖、迁移和血管生成能力，减少As病理进程中EPCs的功能损伤，且这种作用是通过AMPK激活实现的。为了更好的阐明红景天苷的内皮保护作用，在课题的基础上，我们同时研究了红景天苷对内皮功能的影响，选用同型半胱氨酸干预诱导内皮损伤和凋亡，证实了红景天苷可通过抑制内质网应激减少内皮细胞凋亡，且这一保护作用是通过AMPK活化来实现的。本课题通过对AMPK磷酸化活化的调控探讨AMPK在红景天苷上调PI3K/Akt通路及调节EPCs生物活性中的作用，探索红景天苷的内皮保护功能及作用机制，有利于对红景天苷的心血管保护作用提供一个科学合理的解释，为红景天苷在动脉粥样硬化性疾病治疗中的临床应用提供理论基础和实验依据。