肝癌侵袭转移关键分子CD151表达调控microRNA筛选及其作用研究

研究发现，四跨膜蛋白CD151参与肿瘤侵袭和转移的多个步骤。基因转录后表达受特异microRNA调控，后者在肿瘤侵袭和转移中起关键作用。前期工作证实，CD151可显著改变肝癌侵袭性、肿瘤血管形成和上皮间质样变，是影响肝癌侵袭转移的关键分子；肝癌组织microRNA表达谱异常与患者预后密切相关。本课题拟在前期工作基础上应用microRNA芯片从具有相同遗传背景肝癌细胞株和肝癌组织中筛选与CD151表达相关microRNA，运用生物信息学手段寻找调控CD151转录后表达的特异microRNA，并进行验证；构建microRNA 前体及抑制体载体转染肝癌细胞改变特异microRNA表达，应用功能分析探索特异microRNA 对靶基因CD151功能的影响；分析其在肝癌组织中的表达及判断预后的价值。这对进一步揭示CD151在肝癌侵袭和转移中作用，寻找肝癌转移新的分子预测标记和治疗靶点具有重要意义。

四跨膜蛋白CD151是影响肝癌侵袭和转移的关键分子，其转录后表达受特异microRNA调控。本课题在前期工作基础上应用microRNA芯片从不同CD151表达肝癌细胞株和肝癌组织筛选与CD151表达相关的microRNA，运用生物信息学手段寻找调控CD151转录后表达的特异microRNA，并进行验证；构建microRNA 前体及抑制体载体转染肝癌细胞改变特异microRNA表达，应用功能分析探索特异microRNA对靶基因CD151功能的影响；分析其在肝癌组织中的表达及判断预后的价值。我们在研究中发现（1）microRNA124是调控肝癌侵袭和转移的关键分子CD151表达的特异microRNA；(2)肝癌细胞株中microRNA-124呈低表达，表达程度与CD151 表达成反比；(3)上调肝癌细胞中microRNA-124表达可以显著降低肝癌细胞侵袭能力、移动能力、新生血管能力、体内肺转移能力及间叶标记的表达，下调肝癌细胞中microRNA-124表达则作用正好相反；（4）microRNA-124靶向调控主要是针对CD151/整合素α6β1四跨膜蛋白复合体起作用；（5）成功合成靶向CD151/整合素α6β1四跨膜蛋白复合体的小鼠单克隆抗体，该抗体能显著抑制肝癌细胞的侵袭、新生血管形成和转移；（6）microRNA-124在肝癌组织中呈过低表达，显著低于癌旁组织和正常肝组织，microRNA-124表达与肝癌患者预后密切相关。通过该研究明确microRNA124可调控肝癌侵袭关键分子CD151/整合素α6β1四跨膜蛋白复合体表达参与肝癌侵袭和转移，这可为进一步阐述CD151在肝癌侵袭和转移中的分子机制，并为其作为肝癌病人预后预测指标和新的治疗靶点提供理论依据。