生物体中高危植物毒素检验关键技术研究

The toxins of poisonous plants are composed by a lot of ingredients.Their levels is low in human body and metabolize rapidly.Moreover there is no specific clinical manifestations in the cases which caused by plant toxins.So it's very difficult to identify these toxins in the field of forensic science.In complex samples such as blood,organs and gastric contents,plant toxins are breakdown through catabolism reactions. Because of serious matrix interferences and uncertain chemical structure,existing techniques and methods can not achieve the requirements of sensitivity and accuracy.. Therefore,this project is intended to choose three typical poisonous plants which is Tripterygium wilfordii Hook,Gelsemium elegans and Nerium oleander to study by animal experiments.Then find out appropriate pre-treatment methods and use advanced equipment such as LC/MS to analyse these toxins and their metabolites.We will choose some poisoning markers and establish the methods for detction these markers in complex matrices.In order to provide evidences and technical support when public security departments handle some poison cases and accidental poisoning cases involving poisonous plants.And fight against this kind of crime effectively.

有毒植物所含成分复杂多样、毒性大、含量低且在人体内代谢迅速、中毒无特异性临床表现，由它们引发的的中毒案（事）件，在法庭科学领域一直是检验的难点。在血、脏器、消化物等复杂检材中，植物毒素经代谢分解，再加上杂质干扰，浓度极低甚至结构完全发生变化，现有的检验技术的方法灵敏度和准确度均难以达到办案要求。.为此，本课题拟以雷公藤、钩吻、夹竹桃为研究对象，通过动物实验，选用适当的前处理方法和技术设备，分析其所含成分及这些成分的理化性质和代谢产物，从中选取中毒标志物，建立复杂基质中这些标志物的检验方法。以此供案件承办单位对涉及有毒植物的凶杀案件、投毒案件、意外中毒事件等分析案件发生过程、印证犯罪过程等。为公安机关办案提供技术支撑和法庭证据，进而有力打击此类违法犯罪行为。

[项目背景] 有毒植物所含成分复杂多样、毒性大、含量低且在人体内代谢迅速、中毒无特异性临床表现，由它们引发的中毒案（事）件，在法庭科学领域一直是检验的难点。在血、脏器、消化物等复杂检材中，植物毒素经代谢分解，再加上杂质干扰，浓度极低甚至结构完全发生变化，现有的检验技术的方法灵敏度和准确度均难以达到办案要求。[主要研究内容]建立法庭毒物学领域中有毒植物（雷公藤、钩吻、夹竹桃）所含毒素的检测和判定方法。主要分析这些有毒植物的提取物，找出其进入生物体经循环代谢后具有代表性的有毒成分，研究血液、胃组织、肝脏组织等复杂生物检材中这些有毒成分的检测方法，并建立这些成分的动物中毒模型，检测它们在动物血液、肝脏、胃内容中的含量。建立相关的植物毒素检验技术规范，为判断各类案(事)件性质提供科学依据。[结果和数据] (1)通过分析雷公藤、钩吻、夹竹桃有毒植物的提取物，找到其主要毒性成分，主要有雷公藤甲素、雷公藤内酯酮、雷公藤内酯甲、雷公藤红素、钩吻素甲、钩吻素子、夹竹桃苷和夹竹桃苷乙。并建立其在植物中的提取、检验方法，确定了主要毒素在有毒植株中的分布情况。(2)建立了生物检材包括血、肝、胃等组织中雷公藤甲素、雷公藤内酯酮、雷公藤内酯甲、雷公藤红素、钩吻素甲、钩吻素子、夹竹桃苷和夹竹桃苷乙的液相色谱-电喷雾质谱法分析方法，所建立方法不受生物检材中内源性的杂质干扰且分离度好，其定性定量方法准确可靠。(3)建立有毒植物毒素的小鼠中毒模型，通过分析其在体内代谢后的毒性成分得到其代表性的毒性成分。小鼠经一次性灌胃给药后，雷公藤、钩吻、夹竹桃主要有毒成分均广泛分布在体内各组织中，其中胃、小肠和肝脏是雷公藤和夹竹桃毒素的主要分布脏器，而钩吻毒素在胃、小肠和膀胱中毒素含量最高。[科学意义] 项目以雷公藤、钩吻、夹竹桃为研究对象，通过动物实验，选用适当的前处理方法和技术设备，分析其所含成分及这些成分的理化性质和代谢产物，从中选取中毒标志物，建立复杂基质中这些标志物的检验方法。以此供案件承办单位对涉及有毒植物的凶杀案件、投毒案件、意外中毒事件等分析案件发生过程、印证犯罪过程等。为公安机关办案提供技术支撑和法庭证据，进而有力打击此类违法犯罪行为。