靶向变异型CTNNB1的过继细胞治疗肝细胞癌的研究

Hepatocellular carcinoma (HCC) is a malignancy that endangers the people’s health and life due to lack of effective treatment measures. We isolated specific CD8 tumor infiltrating lymphocytes (TIL) against mutant neoantigen-CTNNB1 D32Y from a HCC patient and observed notable antitumor function after in vitro proliferation. In view of this finding, we seek to increase the number of patients to identify more alteration sites followed by acquisition of corresponding CD8 TIL and construction of engineered T cell receptor (TCR)-T lymphocytes. Eventually, we will employ these two specialized lymphocytes to adoptive treat HCC patients after partial hepatectomy for diminishing the relapse rate and eradicating the residual tumor foci.

肝细胞癌（HCC）是严重危害我国人民生命和健康的疾病，目前缺乏有效的治疗手段。我们前期从HCC患者的肿瘤组织中分离到了针对新抗原-CTNNB1中D32Y突变位点的特异性肿瘤浸润CD8 T淋巴细胞，经体外纯化扩增后，证实其具有强大的杀伤肿瘤功能。本课题拟以此为基础，扩大临床样品数量，鉴定变异型CTNNB1的其他表位，纯化出相应的具有杀伤作用的肿瘤浸润CD8 T淋巴细胞，并进一步构建出工程性T细胞受体-T淋巴细胞。实现应用这两种针对变异型CTNNB1的特异性T淋巴细胞过继治疗HCC切除术后患者，降低肿瘤复发率及消灭手术没有切除的肿瘤灶的目标。

本课题旨在研究肝细胞癌（HCC）相关肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）的抗肿瘤功能。尽管目前利用TIL治疗HCC的进展并不顺利，但仍存在改进TIL抗肿瘤功能，实现过继免疫治疗疗效的可能。本课题通过类器官和患者来源的异种移植（PDX）小鼠模型评价TIL抗HCC的功能和效果，发现其中含有三级淋巴样结构（TLS）的TIL具有强大的抗HCC功能，其机制与TLS中含有的初始T淋巴细胞第二群有关。这为将来应用TIL有效治疗HCC提供了预测方法，为TIL的过继免疫治疗开发了一种有前景的患者筛选方案。.本课题构建了两种能够长期真实地保持原始肿瘤临床病理特征的模型，即类器官和PDX模型。并用多种技术，如免疫组织化学染色、乳酸脱氢酶测定、碘化丙啶（PI）染色、流式细胞术、单细胞转录组测序等检测了T细胞的功能亚群和杀伤肿瘤能力。我们发现基于HCC的类器官和PDX模型可以作为评估过继免疫细胞杀肿瘤功效的平台。