PPARδ在非酒精性脂肪肝糖代谢信号通路中作用研究

非酒精性脂肪肝(NAFLD）与肥胖、高血糖、高血脂、胰岛素抵抗等密切相关，也是胰岛素抵抗在肝脏的表现。改善胰岛素抵抗是防治NAFLD必要步骤。PPARδ在多种组织中能调节脂肪代谢、提高胰岛素敏感性、维持能量稳态，抗击脂质异位沉积所致脂毒性。因此PPARδ激动剂作为治疗以糖脂代谢紊乱为主的NAFLD很有前景。但PPARδ对肝脏的糖代谢、脂质沉积的影响和作用机制还不清楚。本课题拟对PPARδ基因敲除鼠和高脂饮食NAFLD模型鼠对比研究，应用PPARδDNA基因芯片分析、Western blot、PCR等技术，探讨PPARδ在NAFLD糖代谢、胰岛素抵抗、能量转换中的关键靶基因和信号传导通路；观察PPARδ配体GW501516对2模型组鼠肝细胞糖脂代谢转换过程的分子机制和对脂肪变的影响，明确PPARδ在NAFLD 糖代谢中作用，了解GW501516的治疗效果，为治疗NAFLD寻找新理论基础

非酒精性脂肪肝(NAFLD）与肥胖、高血糖、高血脂、胰岛素抵抗等密切相关，是胰岛素抵抗在肝脏的表现。改善胰岛素抵抗是防治NAFLD必要步骤。PPARδ在多种组织中能调节脂肪代谢、提高胰岛素敏感性、维持能量稳态，抗击脂质异位沉积。 本项目选用PPARδ高选择性配体激动剂GW501516作为NAFLD治疗的靶标药物，应用PPARδ基因敲除小鼠和高脂饮食NALFD模型小鼠对比研究，应用PPARδDNA基因芯片分析、Western blot、PCR等技术，探讨PPARδ在NAFLD 胰岛素抵抗、能量转换中的关键靶基因和信号传导通路；结果显示：1） GW501516对NAFLD模型大鼠体指数、糖脂代谢等方面的影响都优于吡格列酮，可能是通过上调血清IGF-1、肝脏GLUT-2，下调肝脏SREBP-1c表达，减轻胰岛素抵抗，进而对NAFLD起治疗作用。2）经PPARδ激动剂GW501516干预治疗，可使高脂诱导的非酒精性脂肪肝治疗组大鼠（GW），CPTⅠ基因表达明显增加(P<0.05)，说明GW501516能增强脂肪酸的氧化能力，ACOX1、ACOX3基因表达增加(P<0.05)，肝脂肪酸分解代谢增强了；DGAT1mRNA转录水平没有变化，说明GW501516不增加脂肪酸合成。与正常对照组相比,高脂饮食组（HF）参与甘油三酯合成的DGAT1mRNA表达上调(P<0.05)；说明HF组甘油三酯的合成增多了， 线粒体脂肪酸β-氧化的限速酶CPT-1mRNA和参与过氧化物酶体脂肪酸β-氧化的ACOX1mRNA也反馈性表达上调（P<0.05)、ACOX3mRNA转录水平没有变化。说明PPARδ激动剂可能通过促进脂肪酸的氧化分解使沉积于肝脏中的脂质减少，达到治疗脂肪肝的作用。在国际会议Poster展出2篇，中文收录1篇。3）NAFLD组和正常组间共筛选出267个差异基因，其中上调191个，下调76个。上调的基因主要为细胞内生物合成，氧化应激，纤维化等相关基因，葡萄糖物质代谢酶基因（如：GCK)。下调基因有胰岛素激素受体基因,脂肪酸代谢相关基因, 信号转导及转录相关基因（如STAT3)。 结论：非酒精性脂肪肝大鼠和正常大鼠肝组织的基因表达谱存在差异，特别是在能量代谢相关基因方面。 C57BL/6J PPARδ基因敲除小鼠可能存在类似基因表达谱差异。这部分工作仍在进行中