温度对RNA沉默的抑制及其分子机理研究

RNA沉默介导的抗性是一种新的植物抗病毒育种策略，对RNA沉默发生或抑制的各种生物或非生物因素的探索，已成为植物病毒学研究领域中的热点。本项目是在长期对RNA沉默及其介导病毒抗性研究的基础上，利用已获得的RNA沉默介导抗性转基因植物，即表达不可翻译PVY-CP基因的T4代转基因烟草为材料，分析不同温度下生长的转基因烟草植株中转基因mRNA积累水平，明确RNA沉默保持或抑制的温度。结合病毒学领域中参与RNA沉默途径的植物编码物质的最新研究进展，采用Northern杂交技术，分别对RNA沉默保持和抑制的植株进行RdRP和Dicer核酸酶表达水平及沉默信号siRNA积累量分析，解析由于温度的变化导致RNA沉默抑制的因素，从分子水平上阐明温度影响RNA沉默及其介导病毒抗性的作用机理。所得结果不仅可以丰富RNA沉默的理论体系，而且还能为RNA沉默介导病毒抗性这一策略的实践应用提供新的资料。