高效表达人IL-24重组蛋白HEK293工程细胞株的建立和鉴定

IL-24能够在体内和体外抑制多种肿瘤细胞生长，选择性诱导肿瘤细胞凋亡，而对正常细胞没有明显毒副作用，它具有免疫调节能力，是一种比p53更有广谱抗瘤活性的第一个既抑制肿瘤生长又刺激免疫系统的基因。它和其他药物的联合使用可产生叠加的抗瘤效果，目前正在进行Ⅱ期临床实验研究。在哺乳动物细胞中表达的IL-24蛋白对保持其高效的生物学活性至关重要，分泌表达的可溶性IL-24蛋白具有抗瘤功能和Th1样细胞因子样活性，我们实验室已经在HEK293细胞中分泌表达了带myc和His标签的IL-24重组蛋白。为了提高重组蛋白的分泌表达水平，我们首先以全长的IL-24为研究对象，建立高效的哺乳动物工程细胞表达体系；其次，筛选具有生物学活性的IL-24截短突变体，获得高效分泌表达的工程细胞株；最后，对工程细胞株进行无血清悬浮培养的驯化，对重组蛋白进行纯化和鉴定。本课题能够为IL-24有效地应用于临床奠定实验基础。