基于BDNF的补骨脂植物雌激素成分调节海马神经再生抗围绝经期抑郁症研究

Perimenopausal depression, a common mental disorder occurs in the perimenopausal period had serious harm to the quality of life of patients and even their lives. Lots of studies found that estrogen levels in perimenopausal women dramatically drop accompanied with dysfunction of hippocampal neurogenesis which induces perimenopausal depression. Traditional Chinese Medicine theory holds that the kidney is the key to the incidence and outcome of perimenopausal depression. So tonifying kidney should be used throughout the treatment of perimenopausal depression. Psoralea corylifolia is a traditional Chinese medicine which can tonify kidney.We found that psoralen, isopsoralen and bakuchiol,extracted from psoralea corylifolia were phytoestrogens and have potential anti depressant like effects. The present study tries to employ H19-7 cell and a chronic unpredictable mild stress rat model of perimenopausal depression to investigate the molecular mechanism by which the above phytoestrogens can treat with perimenopausall depressive disease, to expand the clinical application of psoralea corylifolia, to provide new ideas for studies on estrogenic-like traditional Chinese medicines for treatment of perimenopausal depression.

围绝经期抑郁症发生率高且严重危害患者生活质量甚至生命。现代药理研究显示雌激素急剧减少导致BDNF对海马神经再生调节发生障碍是该症发生的重要机制。雌激素替代疗法因其副作用限制了它的应用，植物雌激素在发挥作用的同时还能规避副作用。中医理论认为肾虚是该症发病与转归的关键,补肾应贯穿始终。课题组前期发现补肾中药补骨脂中补骨脂素、异补骨脂素和补骨脂酚具有植物雌激素样作用及较强的雌激素受体亚型选择性。以往研究及课题组发现上述成分具有潜在的抗抑郁作用，但未见从雌激素-BDNF角度深入研究其抗围绝经期抑郁作用及机制的相关报道。因此，本课题以补骨脂素、异补骨脂素和补骨脂酚为研究药物，使用大鼠海马祖细胞H19-7和围绝经期抑郁模型大鼠，以补骨脂植物雌激素效应及其对BDNF调节为切入点，深入探讨上述成分对海马神经再生的影响，阐明补骨脂抗围绝经期抑郁的作用机制，为补骨脂在抗围绝经期抑郁方面的临床应用提供科学指导。

雌激素急剧减少导致BDNF对海马神经再生调节发生障碍是围绝经期抑郁症发生的重要机制之一。雌激素替代疗法易产生副作用，而中药中的植物雌激素类药物成为围绝经期抑郁症治疗的重要药物。补骨脂为豆科植物补骨脂地干燥成熟果实，为补阳类中药，具有补肾助阳、固精缩尿、温脾止泻、纳气平喘的功效。临床可用于肾阳不足型围绝经期抑郁症的治疗。本项目采用体外培养的海马H19-7细胞为工具细胞，首先以促海马细胞增殖活性和分化为指标，从补骨脂中具有植物雌激素活性的三个单体成分补骨脂素、异补骨脂素及补骨脂酚中筛选出具有显著促海马增殖作用的补骨脂单体异补骨脂素。异补骨脂素能促进正常培养状态及缺氧培养状态下海马H19-7细胞增殖活性；通过使用雌激素特异性核受体拮抗剂ICI 182,780和Trk B 拮抗剂K252a发现，该促增殖活性与异补骨脂素的植物雌激素活性无关，而是通过促进脑源性神经营养因子及其受体Trk B表达并激活其下游信号通路CREB的磷酸化相关。此外，我们还成功制备了去势并温和慢性不可预期刺激致绝经期抑郁模型小鼠。通过上述模型小鼠，我们发现模型组小鼠子宫重量显著降低，异补骨脂素具有增加小鼠子宫重量的趋势；采用旷场实验我们发现异补骨脂素对小鼠总行走距离、中心区域探索次数等均无显著影响，提示异补骨脂素对小鼠的自主活动无显著影响；但是，通过悬尾实验和强迫游泳实验我们发现异补骨脂素能显著降低小鼠在悬尾实验及强迫游泳试验中的不动时间，说明异补骨脂素具有抗绝经期抑郁样作用。异补骨脂素显著增加去势并温和慢性不可预期刺激致绝经期抑郁模型小鼠海马组织中NE、5-HT及DA的含量（p<0.01或p<0.05）。.综上所述，本研究发现补骨脂中有效成分异补骨脂素显著促进海马H19-7细胞增殖活性，其作用与异补骨脂素促细胞内BDNF及CREB磷酸化表达有关，而与其植物雌激素样作用无关。同时，异补骨脂素的抗绝经期抑郁样作用可能与调节海马组织内NE、5-HT及DA的含量有关。