荞麦主要过敏蛋白的定点突变及致敏机制研究

近年来，食物过敏的发生率逐年增加，但对发病机制的研究远远落后于对其症状的描述，成为困扰人们的一大难题。采用现代生物技术从分子水平上认识过敏的实质并采取有效的措施预防和治疗具有重要的理论和实践意义。本项目将在先前研究的基础上，对天然和重组荞麦过敏原TBa开展深入系统的研究。采用双向电泳，质谱分析等获得适合肽质量指纹图谱分析的过敏蛋白片段，经图象扫描和计算机软件分析确定各蛋白点的分布情况，分子大小及等电点等。同时经特异性IgE抗体生物学活性鉴定，筛选出与抗体结合的肽段，确定其抗原决定簇的氨基酸序列。通过定点突变技术获得特异性突变体，进而用免疫学方法分析、比较荞麦过敏蛋白的分子特征，揭示致过敏的可能机制。为荞麦过敏蛋白基因的分子改造、基因疫苗和诊断试剂的研制提供理论依据。