靶向结直肠癌Neoantigen特异性细胞毒T细胞免疫组库研究

Colorectal cancer is one of the most common gastrointestinal tumors with increasing incidence in China. Traditional treatments couldn't receive more clinical benefits. With the rise of precision medicine and development of immunnotherapy, tumor neoantigen and specific cytotoxic T cell are the new promising powerful tools to treat colorectal cancer. This research will do gene sequencing of tumor, paracancerous tissue and normal tissue to identify neoantigen information carried by different colorectal cancer patients. Based on gene information of neoantigen , polypeptide will be produced and DC vaccine will be prepared. Specific cytotoxic T cell will be induced and expanded after identification and separation of immune repertoire technology. Specific cytotoxic T cell will be transfused into patients to control progression of tumor and erase residual tumor lesion.

结直肠癌是消化道常见的恶性肿瘤之一，在我国的发病率逐年上升。传统的治疗手段已无法取得更多的临床获益。随着精准医学理念的兴起及肿瘤免疫治疗的进步，肿瘤新抗原及特异性细胞毒T细胞成为了治疗结直肠癌新的有力工具。本研究对肿瘤组织、癌旁组织及正常组织进行基因测序，通过比对寻找不同结直肠癌患者肿瘤中的新抗原基因信息，利用基因信息合成多肽后制备DC疫苗，诱导产生靶向新抗原的特异性细胞毒T细胞，通过免疫组织库技术鉴定、分选这类特异性细胞毒T细胞后扩增培养，回输入患者体内，最终达到控制肿瘤疾病进展、消灭残存肿瘤病灶的效果。

研究背景：.近年来肿瘤的免疫治疗发展迅速，免疫治疗已成为继手术、化疗、放疗之后的第四大主流治疗方式，被认为是二十一世纪肿瘤综合治疗模式中最活跃、最有发展前途的一种治疗手段。免疫组库指的是特定时间段内机体内T淋巴细胞和B淋巴细胞多样性的总和,它反映机体免疫系统在特定时间段内应对外界刺激应答的能力。T细胞应答与抗肿瘤免疫反应关系极为密切。检测免疫组库的变化可以反映特定T细胞克隆扩增的程度，从而反映T细胞功能状态。对抗原特异性T细胞的监测是研究肿瘤病情变化以及监测抗肿瘤免疫治疗效果的必不可少的手段。.研究内容：.1、建立同时性结直肠癌肝转移同期根治性切除术标本收集与TCR测序分析标准化流程；.2、将同时性结直肠癌肝转移肠原发灶与肝转移灶进行免疫组库测序，从肿瘤的空间异质性方面探索原发肿瘤与转移肿瘤的免疫特征差异。.3、通过于无远处转移的结直肠癌肠道病灶进行对比，分析两免疫组库多样性、克隆性等指标，探索转移相关的特殊TCR区段。.4、收集同时性结直肠癌肝转移同期手术患者的术前、术后外周血，分析免疫组库的时间动态变化。.重要结果和关键数据：.1、肿瘤病灶免疫组库测序提示原发灶与转移灶具有相似的免疫克隆分布，但转移灶的TCR多样性低于原发灶、克隆性高于原发灶，呈免疫抑制状态。.2、同时性结直肠癌肝转移患者的肿瘤组织免疫组库中，β链V区6-1和30区段均呈现明显扩增趋势；β链J区多区段基因扩增显著，以BJ2-7区段最为显著。.3、无远处转移的结直肠癌病灶免疫组库多样性较高。.4、术前外周血TCR免疫组库多样性较肠原发灶高，术前外周血可以在一定程度上反映肠原发灶的免疫特征。.5、术后外周血较术前外周血TCR多样性有增高趋势，说明解除肿瘤负荷后，患者TCR免疫组库多样性在一定程度上得以恢复；术后外周血TCR免疫组库多样性较健康人群低，且部分基因使用频率存在显著差异。.科学意义：.1、了解同时性结直肠癌肝转移原发灶与转移灶的免疫空间异质性，为精准免疫治疗提供治疗依据。.2、通过外周血免疫组库术前术后动态变化，监测免疫治疗效果。