炎症和氧化应激在EETs防治非酒精性脂肪性肝病中的作用

Non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) is a common chronic liver disease worldwide, which frequently co-exists with cardiovascular disease. Inflammation and oxidative stress are important initiation and promotion factors in NAFLD; they are also vital therapeutic targets for NAFLD. In our previous experiments, we have demonstrated that cytochrome P450 epoxygenase 2J3 overexpression significantly reduced insulin resistance in rats treated with fructose and db/db mice. Therefore, we hypothesize that EETs slow down development and progression of NAFLD by suppressing hepatic inflammation and oxidative stress. In this project, the mechanisms of anti-inflammatory and anti-oxidatant of EETs on NAFLD will be investigated in C57BL/6J mice treated with high-fat diet. Furthermore, we also probe protection roles of endogenous or exogenous EETs on palmitic acid-induced hepatic cells damage in vitro. In this project, we will clarify the beneficial roles and mechanisms of AA-cytochrome P450-EETs system in NAFLD, which also provide a novel target for the prophylaxis and treatment of NAFLD.

非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）多与心血管疾病同时存在，成为世界范围内的公共卫生问题。炎症与氧化应激是非酒精性脂肪性肝病的重要启动和促进因素，同时也是治疗非酒精性脂肪性肝病的重要靶点。花生四烯酸CYP表氧化酶基因2J3过表达显著改善模式动物肝脏胰岛素抵抗。因此我们认为EETs能够通过抑制肝脏组织的炎症和氧化应激延缓脂肪性肝病的发生发展。本项目拟在高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝病模型中，研究EETs在改善非酒精性脂肪性肝病中的作用及其抗炎抗氧化机制；并在细胞水平，研究内源性及外源性EETs对游离脂肪酸诱导的肝细胞损伤的作用及可能的分子机制。通过本项目研究将阐明AA-CYP表氧化酶基因-EETs系统在非酒精性脂肪性肝病的作用及其机制，同时为预防和治疗非酒精性脂肪性肝病提供新的靶点。

我们课题组的前期实验证实花生四烯酸CYP表氧化酶基因2J3过表达显著改善模式动物肝脏胰岛素抵抗，因此我们认为EETs能够通过抑制肝脏组织的炎症和氧化应激延缓脂肪性肝病的发生发展。在动物实验部分，分别给予雄性内皮特异性CYP2J2转基因小鼠、正常野生型C57BL/6小鼠喂养高脂饲料诱导非酒精性脂肪性肝病及高脂血症小鼠模型，分别研究CYP2J2过表达对高脂饮食诱导的NAFLD及高脂血症小鼠的作用及其机制。结果证实CYP2J2过表达显著降低高脂饮食诱导的小鼠血清甘油三酯、谷丙转氨酶、谷草转氨酶水平的升高。CYP2J2过表达显著降低高脂饮食诱导的肝脏脂肪变性、炎症反应、氧化应激。另外，我们证实CYP2J2过表达对血浆中脂肪酸的含量无明显作用，但CYP2J2过表达显著抑制高脂饮食诱导的肝脏脂肪酸升高，并显著增加肝脏和血管组织中脂肪酸β氧化相关蛋白的表达水平。在细胞实验部分，我们进一步研究CYP2J2过表达及和外源性EETs对棕榈酸诱导的肝脏细胞作用。CYP2J2过表达和外源性14,15-EET显著逆转棕榈酸诱导肝脏细胞甘油三酯水平的升高，减轻肝脏细胞脂质沉积，进一步的机制研究证实CYP2J2过表达和外源性14,15-EET通过AMPKα/PPARα/CPT-1增加脂肪酸β氧化，显著增加脂肪酸β氧化相关蛋白的表达水平。另外，我们证实14,15-EET显著降低棕榈酸诱导的肝脏细胞炎症反应和氧化应激。通过本项目研究阐明AA-CYP表氧化酶基因-EETs系统在非酒精性脂肪性肝病和高脂血症的作用及其机制，同时为预防和治疗非酒精性脂肪性肝病及高脂血症提供新的靶点。