血清miRNA作为信号分子在胰岛素抵抗行形成中的调节作用

To analyse of small molecules of RNA in sera of ob/ob mice with Solexa sequencing method, and real-time quantitative PCR validates Solexa results; Observing the change of significantly elevated serum microRNAs in main organization of insulin resistance, biological function, the effect of secretory microRNAs on protein targets and insulin tolerance test in mice. Study on serum microRNA, as a signaling molecule, in the regulation of insulin resistance in type 2 diabetes.

采用Solexa测序方法对ob/ob肥胖小鼠血清中的小分子RNA进行测序分析；实时定量PCR 对Solexa结果进行验证；观察血清中显著升高的microRNAs在胰岛素抵抗主要发生组织中的变化；选取变化最显著的microRNA进行生物学功能鉴定，观察血清中分泌的microRNA对靶细胞蛋白表达的影响，对小鼠胰岛素抵抗发生的影响。研究血清microRNAs作为信号分子在胰岛素抵抗行形成及促进2 型糖尿病发生中的调节作用。

最近研究发现，细胞分泌的miRNAs作为一种新型的信号分子能够介导细胞之间的相互作用。课题组前期研究发现，2型糖尿病动物模型ob/ob小鼠的血清中miR-122的含量显著升高，本文进一步研究ob/ob小鼠血清中miR-122升高的原因及其在2型糖尿病发病过程中的作用。原代培养BALB/c小鼠肝细胞，高脂刺激后小鼠原代肝细胞分泌的微囊泡（MVs）中miR-122含量显著增加，提示高脂环境下肝细胞能够选择性的将miR-122包裹到MVs中并将其分泌到细胞外，导致ob/ob小鼠血清中miR-122水平升高而肝脏中miR-122含量下降；定量检测ob/ob小鼠脑组织中miR-122的表达水平是C57BL/6J小鼠脑组织中的1.67倍，而C57BL/6J小鼠和ob/ob小鼠脑组织中pre-miR-122的水平却没有明显差异。Western blot分析发现PPAR-α蛋白在ob/ob小鼠肝脏中的表达水平显著高于在C57BL/6J小鼠肝脏中的表达，说明肝脏中miR-122含量的下降能够导致PPAR-α蛋白表达的增加；ob/ob小鼠脑组织PPAR-α蛋白表达下降，提示ob/ob肥胖小鼠脑中升高的miR-122可能抑制了PPAR-α蛋白的表达。肝脏分泌的miR-122作为一种信号分子在ob/ob小鼠病理生理过程中发挥重要的调节靶细胞蛋白的作用。