金黄色葡萄球菌中非编码小RNA的分离、鉴定及其在生物被膜发育中的调控机制研究

金葡菌是临床上最常见的生物被膜形成细菌之一。近年来，随着倾入性手术及新型生物材料的临床应用日益增多，金葡菌生物被膜感染的发生率也急剧上升。与浮游金葡菌引起的感染相比，生物被膜感染具有难治性、持续性和反复性的特点，使得感染迁延不愈，为了彻底清创常需要进行二次翻修手术甚至更换新的植入材料，这给患者带来了极大的肉体痛苦、精神折磨和经济损失，因此研究生物被膜发育的分子机理意义重大。sRNAs是生物被膜发育过程中发挥重要功能的调节性RNA分子，其调控功能的发挥需要分子伴侣Hfq蛋白的参与。本项目拟使用抗Hfq的抗体通过免疫共沉淀的方法发掘参与生物被膜发育调控的sRNAs，并阐明其中1-2个sRNAs调控生物被膜发育的分子机理。sRNAs的鉴定及其调控机理的研究不仅有助于理解生物被膜的发育机制，而且有助于寻找特异的药物作用靶点，进而为定向药物研发及治疗生物被膜感染奠定理论基础。

金黄色葡萄球菌（S.aureus）是临床上最常见的生物被膜形成菌之一，形成生物被膜后导致的感染具有难治性、持续性和反复性特点。本研究较为系统地揭示了Rot 调节菌体自溶进而参与生物被膜发育调控的分子机理，证实了菌体自溶在生物被膜发育中的角色与功能。具体来说，Rot通过两个通路调节菌体自溶：（1）负调控lytM 和 lytN 的基因转录表达；（2）非依赖LytRS途径调节上调lrgAB的表达。另外，证实了lytA 、 atl以及Cid 基因簇等常规参与菌体自溶的基因并未参与S.aureus NCTC8325的菌体自溶调节。