本研究首先构建了库容为2×10(8)的随机化CDR3抗体库,筛选到抗小鼠IgG抗体,证明单纯改变VHCOR3可以得到新的特异性抗体。进一步用四种不同长度随机化VHCDR3与胚系VH基因重组,配以多样性轻链基因,构建了库容为4×10(8)的半合成抗体库,从中筛选 到了抗人IgG、小鼠IgG、胃蛋白酶、人角蛋白、基质金属蛋白酶-2等多种抗原的人单抗,初步达到了不经免疫在体外制备人单抗的目的。并对所获抗人角蛋白Fab段用链替换的方法进行了体外亲和力成熟,将亲和力提高了23倍。此外还建立了用硫氰酸盐洗脱法测定噬菌体抗体相对亲和力和差异筛选抗体库中亲和力较高克隆的技术。本工作为国内人源抗体的研制开发打下了基础。
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数据更新时间:2023-05-31
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