双歧杆菌介导GrB以67LR为靶分子的抗肿瘤基因治疗研究

恶性细胞侵袭并穿过基膜是肿瘤转移的关键环节。层粘蛋白受体67LR在介导恶性细胞对基膜的侵袭和溶解过程中发挥极为重要的作用，是转移性细胞的标志分子，在恶性细胞中高表达。项目拟采用双歧杆菌为载体介导淋巴细胞颗粒酶B（GrB）进行以67LR为靶分子的抗肿瘤转移基因治疗研究。首先构建双歧杆菌表达载体，将GrB与层粘蛋白67LR结合肽LamB1的融合基因克隆到表达载体中，电穿孔法转化长型双歧杆菌，筛选GrB-LamB1转基因双歧杆菌。体外检测GrB-LamB1在转基因双歧杆菌中的表达。体外实验验证GrB-LamB1表达蛋白67LR阳性大肠癌细胞的细胞毒性，实验性大肠癌动物模型体内抗肿瘤实验分析GrB-LamB1转基因双歧杆菌静脉注射或口服对肿瘤生长和转移的抑制作用。双歧杆菌在瘤体乏氧区选择性生长和繁殖，在瘤体局部表达GrB-LB1，特异性杀伤恶性肿瘤细胞，有望能较好地解决肿瘤转移治疗的问题。