以生脉制剂为例探讨名方制剂"病-证相关"精准治疗生物学基础的研究方法

Classic formula and preparations formed by syndrome differentiation and treatment have become clinical effective tools and they have been widespread used for Chinese and western medicine. How to ensure the safety and efficacy of classic formula in clinical treatment is the common challenges of Chinese and western medicine. Based on our previous systematic studies of Sheng-Mai preparations, we proposed that "It is an effective way to explore the biological basis for precise treatment based on the syndrome with disease combination, formula-syndrome correspondence, and exploring syndrome with formula". Animal models, revealing qi-yin deficiency and pathological changes in cardiovascular diseases, will be established to identify the general characteristics and specific indicators of qi-yin deficiency treated by Sheng-Mai preparations. The potential biomarkers and underlying pharmacological mechanisms of Sheng-Mai preparations will also be explored by comprehensive multidisciplinary technologies. The eventual purpose of our study is to establish the diagnostic indicators of Sheng-Mai preparations for the treatment of qi-yin deficiency and cardiovascular disease. Our findings would provide some references for clinical precise treatment and application of Sheng-Mai preparations, and finally provide examples and methods for further biological basis investigation of classic formula from the view of syndrome with disease combination.

源于中医辨证施治形成的经典名方成药制剂已成为临床治疗有效的工具，并为中西医广泛使用，如何保障其在临床安全有效的使用是中西医共同面临的挑战。本课题在前期对生脉制剂系统研究的基础上，提出了“从病及证，由方应证，以方探证是研究病-证相关，探讨其生物学基础，为精准治疗提供生物学指标的有效途径”的科研假设，利用所构建的模拟心血管疾病气阴两虚证动物模型，观察其气阴两虚表观指征和心血管疾病病理变化指征，以生脉制剂进行干预，综合应用多学科技术，筛选识别模型构建前后及病程变化过程的共性特征和特异性指标，挖掘发现生脉制剂防治心气阴两虚证的生物标志物，探讨其分子机制，以期阐释心脏疾病发展阶段所对应的气阴两虚证的专属性特征和生物学基础，为临床生脉制剂的精准应用提供生物学诊断指标。探索建立名方制剂“病-证相关”精准治疗现代生物学诊断指标挖掘的方法学和技术体系，为彰显中药有效性、保障用药精准、安全提供参考依据。

本课题首先基于“从病及证，由方应证，以方探证”的病-证相关研究模式，从心脏相关的冠状动脉结扎诱导的慢性心衰小鼠模型入手，以转化医学的思路结合病证相关的研究模式证实了慢性心衰模型小鼠中确实存在与临床慢性心衰患者一致的气阴两虚证，同时明确了气阴两虚证出现的具体时程，分别从病理变化、生理功能变化和生化指标变化等多个层次对气阴两虚证阶段进行了心功能的表征与评价。进而，利用代谢组学技术初步遴选出慢性心衰中气阴两虚证代谢标志物群，并在动物和临床水平对其进行了靶向验证。进一步基于“以方测证”的研究模式，以治疗气阴两虚证的经典方剂注射用益气复脉（冻干）为探针，通过敏感性和特异性进行评价，明确了慢性心衰气阴两虚证的最优代谢标志物Xanthurenic acid。最后，利用转录组学技术初步遴选出了慢性心衰气阴两虚证阶段特异基因群，综合利用药理学、分析化学、分子生物学等技术方法证实了KMO是代谢物Xanthurenic acid含量升高的关键调控酶，并利用调控酶特异性抑制剂以及腺相关病毒构建了心脏特异性KMO敲低鼠验证了其在慢性心衰中的重要性。本研究初步阐明了慢性心衰疾病气阴两虚证的专属性特征和生物学基础，为临床气阴两虚型慢性心衰的临床精准诊断，以及生脉制剂的临床精准应用提供了新的科学数据和诊断指标；为本课题组提出的“从病及证，由方应证，以方探证是研究病-证相关，探讨其生物学基础，为精准治疗提供生物学指标的有效途径”的科学假设提供了研究实证；为“病-证-方-药”结合的研究模式探索了研究方法学。.综上，经过四年的努力，已全面完成课题的预定目标，共发表SCI论文10篇，其中影响因子大于10分文章1篇，申请3项发明专利；培养硕士4名，博士1名，2名青年教师晋升高级职称。