牧草抗病毒基因工程--苜蓿花叶病毒复制酶基因克隆

从我国栽培紫花苜蓿中分离鉴定了苜蓿花叶病毒（Alfalfamosaicvirus,A1MV），暂称中国分离株（Chineseisolate,ch）以该病毒RNA2为模板，用RT-PCR分两段分别扩增了复制酶基因5′端1.32Kb和3′端及其非编码区1.23kbcDNA片段，进行分子克隆和核苷酸序列分析，结果表明：ALMA-Ch复制酶基因由2373个核苷酸组成（包括终止密码UGA），编码790个氨基酸，3′端编码区由166个核苷酸组成。ALMA-Ch与ALMA425进行了同源性比较，结果表明复制酶编码区核苷酸序列同源性为97.8%，而扒测的氨基酸序列同泊性为97.6%，3′非编码区的同源性为98.2%，本研究成果为进一步开展ALMV复制酶基因及其相关片段介导的抗病毒基因工程研究提供了目的基因。