在线分子印迹固相萃取-液相色谱/质谱联用分离分析植物糖苷

Glycosides are important aroma precursors. Selective extraction and rapid qualification are bottlenecks for glycosides analysis. The project will take tobacco glycosides as the research object.Based on the epitope imprinting method,taking the sugar residue of glycosides as an epitope and the correspoding sugar as a template molecule,surface molecular imprinted polymers for selectively extracting glycosides containing this sugar moiety will be synthesized. For a considerable diversity of sugar residues in glycosides, the project will take glycosides only containing a glucose and glycosides only containing a rutinose as examples to explore the selective ectraction of glycosides by surface molecularly imprinted polymers. Rapid determination of glycosides will be achieved by the on-line solid phase extraction-triple quadropoles(QQQ)-foutier tranform mass spectrometry (FTMS). The system will use molecularly imprinted solid phase extraction column to selectively extract glycosides,use neutral loss scan of QQQ　to scan glycosides and use FTMS to acquire the element composition of quazi-molecular ion and multi-stage product ions. Thr method for accurate and high-throughput qualification and quantitation of glycosides will be established. It will provide a reliable means for separation and analysis of plant glycosides.

糖苷是植物中重要的香味前体物质，选择性萃取和快速定性糖苷是糖苷分析瓶颈。本项目以烟草糖苷为研究对象，拟基于抗原决定基法，以糖苷的糖基为抗原决定基，即以相应糖为模板分子，合成可选择性萃取含有该糖基糖苷的表面分子印迹聚合物。糖苷的糖基种类较多，拟以常见的单糖葡萄糖苷和双糖芸香糖苷为例探索抗原决定基表面分子印迹聚合物对糖苷的选择性萃取。拟搭建在线固相萃取/液相色谱-三重四极杆质谱-傅里叶变换质谱联用分析系统，实现烟草糖苷的快速检测。该系统利用分子印迹固相萃取柱实现选择性萃取糖苷，利用三重四极杆质谱的中性丢失扫描出糖苷，利用傅里叶变换质谱获得糖苷准分子离子和多级子离子的元素组成，建立准确并高通量定性和定量分析糖苷的方法，为植物糖苷分离分析提供可靠手段。

围绕如何快速定性和定量烟草糖苷进行了系列研究，主要开展以下研究内容：.1）.采用两种印迹方法（表面印迹和本体聚合印迹）合成糖苷分子印迹聚合物。以芸香糖为模板，高分子环氧微球Poly(GMA-co-TMPTMA)为基质，氨基苯硼酸为功能单体，制备了芸香糖表面印迹材料；以丙烯酰胺和乙二醇二甲基丙烯酸为功能单体，一步制备了芸香糖印迹材料。.2）.建立系统中性丢失扫描表，以中性丢失扫描结合子离子扫描-液相色谱/质谱系统扫描并定性烟草糖苷，一共扫描出64种糖苷，包括39种单糖糖苷、18种双糖糖苷和7种三糖糖苷。在定性的基础上，建立液相色谱/质谱定量烟草糖苷的方法，考察了不同烟草类型糖苷的种类和含量的分布：糖苷总量顺序为：烤烟＞香料烟＞白肋烟；糖苷种类主要以单糖糖苷和双糖糖苷为主，三糖糖苷较少。.3）.开发一种新型的双功能monolith@HKUST-1 dip-it进样器，它既具有固相萃取功能，又是一种进样装置，可以实现原位的检测避免了繁琐的洗脱过程。建立了monolith@HKUST-1 dip-it与实时分析质谱联用快速定量烟草糖苷的方法。.4）.开发了简单的两步合成法制备了麦芽糖后修饰金属有机框架化合物并将其用于糖基化肽的富集之中。材料能从大量的非糖基化肽干扰中选择性地富集到糖基化肽段。