反义-Ribozyme嵌合基因对酶基因表达的影响

一、根据番茄ACC合成酶cDNA序列按锤头状核酶作用方式，设计合成了特异切割LE-ACC2，mRNA第667-669位点GUC序列的核酶基因DNA；二、根据番茄LE-ACC2基因DNA序列，利用PCR技术合成克隆了与ACC2mRNA的696-1086区段互补的反义RNA基因DNA片段；三、将利用PCR技术克隆的ACC2基因DNA片段以及反义方式与核酶连接经酶切电泳和测序分析表明已成功地构建了反义RNA-核酶嵌合基因。上述嵌合基因和核酶基因的构建均属首次。拟用于抑制番茄ACC合成酶的表达，以弥补单用核酶或反义RNA酚表现出的不足，提高抑制效率。这将对探索此类嵌合基因抑制酶基因表达研究具有重要理论和实际意义，尤其对果实保鲜延缓果实软化具有广阔应用前景。