负载siRNA-EGFR的mPEG-PLGA-PLL-cRGD纳米递送系统的构建及抗乳腺癌疗效的研究

基因递送系统是基因治疗从实验研究到临床应用的核心技术问题。申请者在本人博士论文工作的基础上，筛选并合成环肽cRGD修饰的mPEG-PLGA-PLL聚合物为载体材料，以siRNA-EGFR为模型基因，构建载siRNA-EGFR靶向基因递送系统（mPEG-PLGA-PLL-cRGD/ siRNA-EGFR）。体外评价基因递送系统在血清中的稳定性、对MDA-MB-231乳腺癌细胞的靶向性、基因转染效率、基因沉默效率及其细胞毒性的影响，并探讨影响的机制。建立MDA-MB-231乳腺癌乳腺癌动物模型，利用活体荧光成像系统，实时观察载基因纳米粒在动物体内各脏器的分布特征、靶向肿瘤的效果及在肿瘤组织中的停留时间。随后体内评估载基因纳米粒对荷瘤裸鼠的治疗效果。本项目的完成将为该基因递送载体向临床应用的可行性提供具有科学价值的实验数据。

纳米载体对基因的低的荷载和靶向递送效率限制了基因治疗的进一步临床应用。本项目针对上述问题构建了具有高荷载效率和特异的靶向效率的mPEG-PLGA-PLL-cRGD纳米粒递送载体,并用来荷载EGFR-siRNA来进行抗乳腺癌治疗研究。构建的该纳米载体是粒径大小为190nm的纳米粒，具有良好的分散性；同时该纳米粒载体也具有良好的生物相容性，能有效保护EGFR-siRNA不被降解。细胞实验证实，mPEG-PLGA-PLL-cRGD纳米粒能特异和高效的递送EGFR-siRNA到MDA-MB-231乳腺癌细胞。体内的荧光成像和抗肿瘤治疗证实，mPEG-PLGA-PLL-cRGD纳米粒递送载体有效地递送EGFR-siRNA到乳腺癌肿瘤，并展现高效的抗肿瘤效率。